[发明专利]钾离子浓度检测方法有效
申请号: | 201210206227.2 | 申请日: | 2012-06-18 |
公开(公告)号: | CN102735664A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 唐亚林;孙红霞;杨千帆;尚倩;姜薇;盖伟;向俊锋 | 申请(专利权)人: | 中国科学院化学研究所 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/33 |
代理公司: | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人: | 王磊;许伟群 |
地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 离子 浓度 检测 方法 | ||
1.一种检测液体样品中钾离子浓度的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)用pH6.2~8.2的缓冲溶液配制钾离子浓度不同的多个溶液样本,其中每个所述溶液样本中含有相同浓度的能够形成G-四链体的DNA分子以及相同浓度的菁染料;
(2)将所述多个溶液样本置于紫外可见光吸收光谱仪或分光光度计下,检测第一波长处的吸光度值及第二波长处的吸光度值,或者将所述多个溶液样本置于荧光光谱仪下,采用560nm的激发波长,检测波长在第三波长处的荧光强度值,其中所述第一波长在560nm至590nm范围,所述第二波长在500nm至540nm范围,所述第三波长在580nm至640nm范围;
(3)以各个所述溶液样本的钾离子浓度作为横坐标或纵坐标,以步骤(2)中测得的第一波长处的吸光度值或第二波长处的吸光度值或者第一波长处的吸光度值与第二波长处的吸光度值的比值或者第三波长处的荧光强度值为纵坐标或横坐标作图,从而获得钾离子浓度的标准曲线;
(4)在待测液体样品中加入能够形成G-四链体的DNA分子、式I的化合物以及缓冲液,以使待测液体样品中的能够形成G-四链体的DNA分子的浓度、式I的化合物的浓度以及pH值与步骤(1)中的溶液样本一致,从而得到测试溶液;
(5)将步骤(4)中获得的测试溶液置于紫外可见光吸收光谱仪或分光光度计下,检测测试溶液在第一波长及第二波长处吸光度值,或者将所述测试溶液置于荧光光谱仪下,采用560nm的激发波长,检测第三波长处的荧光强度值;
(6)利用步骤(5)中测得的第一波长处的吸光度值或第二波长处的吸光度值或者第一波长处的吸光度值与第二波长处的吸光度值的比值或者第三波长处的荧光强度值在步骤(3)中获得的钾离子浓度标准曲线中找到对应的测试溶液的钾离子浓度值,然后通过待测样品被的稀释倍数计算出待测样品的钾离子浓度。
2.一种在钠离子背景下检测液体样品中钾离子浓度的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)用pH6.2~8.2的缓冲溶液配制钾离子浓度不同的多个溶液样本,其中每个所述溶液样本中含有相同浓度的能够形成G-四链体的DNA分子、相同浓度的钠离子以及相同浓度的菁染料,其中所述溶液样本中的钠离子浓度在10至200mmol/L的范围;
(2)将所述多个溶液样本置于紫外可见光吸收光谱仪或分光光度计下,检测所述溶液样本在第一波长及第四波长处的吸光度值,或者将所述多个溶液样本置于荧光光谱仪下,采用560nm的激发波长,检测波长在第三波长处的荧光强度值,其中所述第一波长在560nm至590nm范围,所述第四波长在610nm至670nm范围,所述第三波长在580nm至640nm范围;
(3)以各个所述溶液样本的钾离子浓度作为横坐标或纵坐标,以步骤(2)中测得的各溶液样本在第一波长处的吸光度值或第四波长处的吸光度值或者第一波长处的吸光度值与第四波长处的吸光度值的比值或者第三波长处的荧光强度值为纵坐标或横坐标作图,从而获得钾离子浓度的标准曲线;
(4)在待测液体样品中加入能够形成G-四链体的DNA分子、式I的化合物以及缓冲液,以使待测液体样品中的能够形成G-四链体的DNA分子的浓度、式I的化合物的浓度以及pH值与步骤(1)中的溶液样本一致,从而得到测试溶液;
(5)将步骤(4)中获得的测试溶液置于紫外可见光吸收光谱仪或分光光度计下,检测所述测试溶液在所述第一波长及所述第四波长处的吸光度值,或者将所述测试溶液置于荧光光谱仪下,采用560nm的激发波长,检测波长在所述第三波长处的荧光强度值;
(6)利用步骤(5)中测得的第一波长处的吸光度值或第四波长处的吸光度值或者第一波长处的吸光度值与第四波长处的吸光度值的比值或者第三波长处的荧光强度值在步骤(3)中获得的钾离子浓度标准曲线中找到对应的测试溶液的钾离子浓度值,然后通过待测样品被的稀释倍数计算出待测样品的钾离子浓度。
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