[发明专利]新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺

说明书

技术领域

本发明为一种新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺，它属于国家鼓励发展的生物产业范畴。“国家十二五科学和技术发展纲要”中指出：生物产业是国家加快培育和发展的战略性新兴产业之一。 

背景技术

众所周知，随着科学技术的迅猛发展，微生物发酵已被广泛地运用到生物制药工业、生物酶和蛋白质工业、轻工业（包括如味精、柠檬酸、山梨醇、氨基酸、酵素、多元醇、淀粉糖等等）、现代农业、现代生物能源产业、环保工业等等，并发挥着越来越大的作用，创造着巨大的经济效益和社会效益。 

由于我们毕业于沈阳药科大学制药系微生物制药专业，具有多年的微生物发酵知识和生产经验的沉淀与积累，并在加拿大、墨西哥、美国长期参加发酵项目的研修，进而拓宽了我们创新思路和成功实践。掌握了具有自己独立知识产权的完整的发酵补料技术。 

我们应用新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺，取得了以下成功案例： 

1．我们把这项新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺，运用到对葡萄糖具有抑制菌体生长和产物生成的（Wild-type and transconjugate F.heparinum for）肝素酶（heparinasesI,II&III）和硫酸软骨素酶（chondroitinases AC&B）发酵生产上，酶产量提高了4倍。

2．我们把自行设计、开发的新颖的PH调控、溶氧调控DO、呼吸商（RQ）补料调控工艺应用于13种微生物、40多个酶、蛋白质或疫苗从6升到190吨不同生产规模的实际运用，取得了在无纯氧补充的条件下，E.coli菌浓（OD600）达到180-220 OD，10-15g/L,可溶性酶蛋白占总蛋白表达量的25%；毕赤酵母（pichia pastoris）菌浓（OD600）达到600-900，酶蛋白表达6-10g/L;S.pombe350-550 OD,酶蛋白表达量7-8g/L;F.beparinum,＞100 OD,酶蛋白表达量＞13倍；假单孢菌（pseudomonas fluorescens）菌浓（OD575）高达250-350 OD，酶蛋白表达15-17g/L；在青霉素发酵生产上，产量比国内产量提高1倍，生产成本降低40%。 

3．我们运用新颖的呼吸商（RQ）补料调控工艺，应用到酵母菌（schizosaccharomyces pombe）发酵生产中，使生产成本降低60%，产量提高了5倍。 

4．到目前为止，我们已有40多个课题，超过13种微生物，累计有近万批次的不同 规模的发酵，已应用过该补料工艺，积累了多次＞3000倍的放大成功经验，用自己编程的同一Deltar-V自动化控制系统在发酵生产中成功运用。 

发明内容

新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺。其中包括新颖的溶氧调控（DO）、PH调控、呼吸商调控（RQ）以及混合调控等多种补料工艺。目前处于世界领先水平。 

1．我们把这项新颖的适用于多种微生物发酵的补料调控工艺，运用到对葡萄糖具有抑制菌体生长和产物生成的（Wild-type and transconjugate F.heparinum for）肝素酶（heparinasesI,II&III）和硫酸软骨素酶（chondroitinases AC&B）发酵生产上，酶产量提高了4倍。 

2．我们把自行设计、开发的新颖的PH调控、溶氧调控DO、呼吸商（RQ）补料调控工艺应用于13种微生物、40多个酶、蛋白质或疫苗从6升到190吨不同生产规模的实际运用，取得了在无纯氧补充的条件下，E.coli菌浓（OD600）达到180-220 OD，10-15g/L,可溶性酶蛋白占总蛋白表达量的25%；毕赤酵母（pichia pastoris）菌浓（OD600）达到600-900，酶蛋白表达6-10g/L;S.pombe350-550 OD,酶蛋白表达量7-8g/L;F.beparinum,＞100 OD,酶蛋白表达量＞13倍；假单孢菌（pseudomonas fluorescens）菌浓（OD575）高达250-350 OD，酶蛋白表达15-17g/L；在青霉素发酵生产上，产量比国内产量提高1倍，生产成本降低40%。 

3．我们运用新颖的呼吸商（RQ）补料调控工艺，应用到酵母菌（schizosaccharomyces pombe）发酵生产中，使生产成本降低60%，产量提高了5倍。