[发明专利]一种快速高效测定葡萄酒中黄烷醇的方法

权利要求书

1.一种快速高效测定葡萄酒中黄烷醇的方法，其特征在于利用超高效液相色谱UPLC和二极管阵列检测器同时对葡萄酒中5种黄烷醇进行分离和测定；

所述5种黄烷醇分别为：儿茶素、表儿茶素、表倍儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表倍儿茶素没食子酸酯；测定步骤为：

（1）标准溶液配置：

分别精确称取所述5种黄烷醇各2.3-16.0mg，用甲醇溶解并转移至10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，封口，作为标准贮备液，在-20℃保存备用；使用前，根据实验需要将此标准贮备液用甲醇稀释至适宜含量，以配制标准工作液和混合标准工作液；

（2）葡萄酒样品进样前过0.45μm滤膜；

（3）超高效液相色谱分离检测条件：

所述超高效液相色谱分析是指通过流动相梯度洗脱，进行紫外波长检测，洗脱和检测条件为：

色谱柱：美国Bridge Ethylene Hybrid (BEH) C18色谱柱或同类UPLC反相C18色谱柱；

流动相：流动相A为2%的乙酸水，流动相B为甲醇；

洗脱程序：0-5.5 min，流动相A为92％-75％，流动相B为8％-25％；5.5-6.5 min，流动相A为75％-60％，流动相B为25％-40％；6.5-8.6 min，流动相A为60％-92％，流动相B为40％-8％；8.6-10 min，流动相A为92％，流动相B为8％；

流速设定：0.3 mL/min；

紫外检测波长：280 nm；

柱温30 ℃，进样量为1 μL，以峰面积外标法定量；

紫外检测选用二极管阵列检测器；

（4）定性：

对所述5种黄烷醇混合标准品进行色谱检测，得到5种黄烷醇标准品色谱图；对葡萄酒样品进行色谱检测，得到葡萄酒样品中5种黄烷醇的UPLC色谱图；通过比较进行定性分折；

（5）制作标准曲线，定量：

制作标准曲线：准确配制0.23-160 mg/L的五个不同浓度的5种黄烷醇的混合标样，按照上述液谱条件进样，进样量为1μL；以峰面积Y为纵坐标，质量浓度X为横坐标，计算得到5条标准曲线；

定量：每种待测物质分别对应于外标做标准曲线，经过UPLC检测后将峰面积代入相对应的标准曲线方程计算出待测物质的含量。