[发明专利]秦川牛FoxO1基因单核苷酸多态性分子标记的检测方法与应用有效
申请号: | 201210210461.2 | 申请日: | 2012-06-25 |
公开(公告)号: | CN103233001B | 公开(公告)日: | 2016-11-02 |
发明(设计)人: | 陈宏;孙雨佳;郭文娇;潘虹;薛璟;蓝贤勇;雷初朝 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 蔡和平 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 秦川 foxo1 基因 核苷酸 多态性 分子 标记 检测 方法 应用 | ||
1.一种秦川牛FoxO1基因的单核苷酸多态性,其特征在于,其基因单核苷酸多态性包括:
秦川牛FoxO1基因第178132位为G或A的单核苷酸多态性。
2.一种秦川牛FoxO1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
以包含FoxO1基因的待测秦川牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增秦川牛FoxO1基因;用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定秦川牛FoxO1基因第178132位的单核苷酸多态性;
所述的引物对P为:
上游引物:5’-GACTCTCCTCCGCACAACGAC-3’ 21nt;
下游引物:5’-GTCCAAGTCACTGGGGAGCTTC-3’ 22nt。
3.如权利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:
94℃预变性5min;94℃变性30s,68℃退火30s,每个循环-1℃,72℃延伸30s,18个循环;94℃变性30s,50℃退火30s,72℃延伸30s,20个循环;72℃延伸10min。
4.如权利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为3%。
5.如权利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述的根据琼脂糖凝胶电泳结果FoxO1基因第178132位碱基多态性为:GG型表现:316bp和89bp;GA型表现:405bp、316bp和89bp;AA型表现:405bp。
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