[发明专利]一种治疗骨质疏松多肽的制备方法

权利要求书

1.一种特立帕肽的制备方法，其特征在于，制备组成特立帕肽的各肽树脂片段，将各肽树脂片段在固相上逐步偶联得到特立帕肽树脂，然后裂解得到特立帕肽粗品，纯化得到产品特立帕肽。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：

A）制备组成特立帕肽的5个肽片段：肽树脂片段1、侧链保护肽片段2，侧链保护肽片段3、侧链保护肽片段4和侧链保护肽片段5，其中所述肽树脂片段1为特立帕肽序列34-26位氨基酸，所述侧链保护肽片段2为特立帕肽序列25-21位氨基酸，所述侧链保护肽片段3为特立帕肽序列20-13位氨基酸，所述侧链保护肽片段4为特立帕肽序列12-7位氨基酸，所述侧链保护肽片段5为特立帕肽序列6-1位氨基酸；

B）将侧链保护肽片段2和肽树脂片段1偶联得到肽树脂Ⅰ；

C)将侧链保护肽片段3和肽树脂Ⅰ偶联得到肽树脂Ⅱ；

D)将侧链保护肽片段4和肽树脂Ⅱ偶联得到肽树脂Ⅲ；

E)将侧链保护肽片段5和肽树脂Ⅲ偶联得到肽树脂Ⅳ；

F)肽树脂Ⅳ裂解得到特立帕肽粗品

G）特立帕肽粗品经纯化得到特立帕肽。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤A）中肽树脂片段1所用的固相载体为王树脂。

4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤A）中侧链保护肽片段2、侧链保护肽片段3、侧链保护肽片段4和侧链保护肽片段5分别由各片段的氨基酸偶联在树脂获得各片段的肽树脂，然后裂解制得。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，所述步骤A）中侧链保护肽片段2、侧链保护肽片段3、侧链保护肽片段4和侧链保护肽片段5所用的固相载体为2-氯三苯甲基氯树脂。

6.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，所述步骤A）中肽树脂片段1、侧链保护肽片段2、侧链保护肽片段3、侧链保护肽片段4和侧链保护肽片段5的偶联剂为HOBT/DIC、PyBOP/HOBt/DIPEA或TBTU/HOBt/DIPEA。

7.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，所述步骤A）中侧链保护肽片段2、侧链保护肽片段3、侧链保护肽片段4、侧链保护肽片段5的裂解剂为TFE。

8.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤B）-步骤E)中侧链保护肽与肽树脂偶联的偶联剂为HOBT/DIC、PyBOP/HOBt/DIPEA或TBTU/HOBt/DIPEA。

9.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤B）-步骤E)中侧链保护肽片段与肽树脂偶联的反应溶剂为DMF、DCM、NMP、DMSO中的一种或几种。

10.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤F)中肽树脂Ⅳ裂解的裂解液为TFA与水体积比为95:5的混合溶液、TFA、DET、PHOH与水体积比为90:5:3:2的混合溶液或TFA、DET、TIS、PHOH与水体积比为80:5:5:5:5的混合溶液。

11.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤G)中纯化为反相高效液相色谱纯化。

12.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：

1）制备组成特立帕肽的3个肽片段：肽树脂片段a、侧链保护肽片段b和侧链保护肽片段c，其中所述肽树脂片段a为特立帕肽序列34-26位氨基酸，所述侧链保护肽片段b为特立帕肽序列25-11位氨基酸，所述侧链保护肽片段c为特立帕肽序列10-1位氨基酸；

2）将侧链保护肽片段b和肽树脂片段a偶联得到肽树脂A；

3)将侧链保护肽片段3和肽树脂A偶联得到肽树脂B；

4)肽树脂B裂解得到特立帕肽粗品；

5）特立帕肽粗品经纯化得到特立帕肽。