[发明专利]检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列和试剂盒

权利要求书

1.一组检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：3所示，其中序列SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2分别为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的正义引物和反义引物，序列SEQ ID NO：3为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的荧光探针。

2.根据权利要求1所述的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列，其特征在于：所述探针序列SEQ ID NO：3的5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团TAMRA或BHQ1。

3.一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的试剂盒，其特征在于，由以下组分组成：

1）裂解液；

2）RT-PCR反应液，包括：PCR缓冲液、RT缓冲液、MgCL₂ 、dNTP、正义引物、反义引物和荧光探针；

3）反转录酶M-MLV；

4）Taq DNA聚合酶；

5）DEPC水；

6）阴性对照：猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）阴性猪组织样品；

7）阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列；

其中，正义引物为序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，反义引物为序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，荧光探针为序列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，其5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团TAMRA或BHQ1。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述RT-PCR反应液中各成分使用终浓度为0.5×PCR缓冲液、0.5×RT缓冲液、3.0mM MgCL₂、0.2mM dNTP、0.2μM正义引物、0.2μM反义引物和0.1μM荧光探针。

5.一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的试剂盒，其特征在于，由以下组分组成：

1）裂解液；

2）RT-PCR反应液，包括：MgCL₂、正义引物、反义引物和荧光探针；

3）RT-PCR酶颗粒；

4）Taq DNA聚合酶；

5）DEPC水；

6）阴性对照：猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）阴性猪组织样品；

7）阳性对照：为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列；

其中，正义引物为序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，反义引物为序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，荧光探针为序列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列，其5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团TAMRA或BHQ1。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述RT-PCR反应液中各成分使用终浓度为3.0 mM MgCl₂、0.2 μM正义引物、0.2 μM反义引物和0.1 μM荧光探针。