[发明专利]抗NKG2A的单克隆抗体

说明书

本申请是申请日为2005年12月27日的题为“抗NKG2A的单克隆抗体”的中国专利申请No.200580045348.1的分案申请。

技术领域

本发明涉及针对NK细胞表面受体NKG2A的单克隆抗体及其片段，以及生产和评价这样的抗体的方法。单克隆抗体及其片段在治疗免疫疾病，尤其是自身免疫性疾病以及其他要求调控NK细胞功能的疾病中是有用的。总体而言，本发明方法涉及使用抗体及其片段，以防止导致促成待治疗疾病病理的表达HLA-E或Qa1^b的细胞如树突细胞或活化T细胞的溶解的NK细胞上NKG2A受体的刺激。

背景技术

保持有效的免疫监视而不引起自身免疫反应需要效应T细胞反应的准确滴定。当免疫系统针对自身抗原发起免疫反应时便出现自身免疫性疾病(参见，例如，Ludewig et al.(1999)Immunol Rev.169：45-54)。尽管在引发和维持自身免疫性反应中涉及的机制还不清楚，但是可能涉及在次级淋巴器官中以前在免疫方面被忽视的抗原的出现。

树突细胞是骨髓来源的抗原呈递细胞(APC)，其在免疫反应中发挥关键作用(参见，例如，O’Neill et al.(2004)Blood104：2235-2246)。DC通过吞噬、胞吞和胞饮作用将细菌、病毒、濒 死细胞和各种复合分子加以内化。并入的蛋白被分解为肽，它们接着与MHC I和II类分子一起被呈递到DC细胞表面上。加载到MHC I类上的抗原通常来源于内源性蛋白并且由CD8+T细胞识别，而MHC II类加载的抗原通常来源于外源蛋白并且由CD4+T细胞识别。在抗原捕获之后，未成熟的DC细胞变成熟而形成了成熟的DC，它们表现出减少的吞噬作用，移动到淋巴组织并且具有增强的T细胞刺激能力。

在淋巴组织中，DC起动原初 T细胞，刺激它们的克隆扩增和分化，并且也可以与B细胞和本身免疫系统的细胞(包括NK细胞)相互作用。活化的NK细胞可以杀伤不成熟的DC细胞，而不是成熟的DC细胞。由于T淋巴细胞的抗原运送和初始敏化主要是通过抗原呈递树突细胞介导的，所以有可能通过树突细胞自身抗原的不合适的呈递至少部分地促进自身免疫性障碍。

自然杀伤(NK)细胞是包括在非传统免疫中涉及的淋巴细胞的亚种群。NK细胞提供一种有效的免疫监督机制，由此可消除不希望的细胞如肿瘤细胞或病毒感染的细胞。NK细胞活性是通过包含两种活化和抑制信号的复杂机制进行调控的(参见，例如，Moretta et al.(2001)Annu Rev Immunol 19：197-223；Moretta et al.(2003)EMBO J EPub Dec 18；Ravetch et al.(2000)Science 290：84-89；Zambello et al.(2003)Blood 102：1797-805；Moretta et al.(1997)Curr Opin Immunol 9：694-701；将其全部内容通过引用结合在此)。

已证实多种不同的NK特异性受体在NK细胞介导的对HLA I类缺陷型靶细胞的识别和杀伤中起重要作用。这些受体(称为NKp30、NKp46和NKp44)是Ig超家族的成员。它们的交联(通过特异性mAb诱导)导致强烈的NK细胞激活，致使细胞内Ca⁺⁺水平升高，触发细胞毒性和淋巴因子释放。重要的是，mAb介导的NKp30、NKp46和/或NKp44的活化导致对于多种靶细胞的NK细 胞毒性的激活。这些发现为这些受体在天然细胞毒性中的一种中心性作用提供了证据。

NK细胞由主要组织相容性复合物(MHC)I类-特异性抑制性受体进行负调控(et al.(1986)Nature 319：675-8；Ohlen et al，(1989)Science 246：666-8)。这些特异性受体与主要组织相容性复合体(MHC)I类分子或HLA的多态决定子相结合，并抑制自然杀伤(NK)细胞溶解。在人体内，称为杀伤Ig-样受体(KIR)的受体家族的某些成员识别HLA I类等位基因的组(参见，例如Yawata et al.(2002)Crit Rev Immunol 22：463-82；Martin et al.(2000)Immunogenetics.51：268-80；Lanier(1998)Annu Rev Immunol.16：359-93；将其全部内容通过引用结合在此)。