[发明专利]一种分离和纯化人参皂苷Rb3的方法

权利要求书

1.一种人参皂苷Rb₃的制备方法，其操作步骤包括：

(1)样品胶的制备

将人参茎叶总皂苷用甲醇溶解，加入总皂苷质量2倍的80～100目硅胶，水浴蒸干至粉末状，成为样品胶；

(2)分离胶的制备

取人参茎叶总皂苷质量20倍的300～400目硅胶，用二氯甲烷充分溶解，超声、搅拌，除气泡制得分离胶；

(3)装柱

干法上样，将步骤(2)获得的分离胶装入到底部有玻璃棉的玻璃柱内，再装入步骤(1)获得的样品胶，最后装入一层石英砂，备用；

(4)洗脱

分别以甲醇和二氯甲烷的体积比为1:4,3:7,2:3,1:1的混合液作为洗脱液，依次进行梯度洗脱，分别收集洗脱流份的同时，采用薄层色谱法检测，收集、合并与人参皂苷Rb₃阳性对照品Rf值相同的流份溶液，用旋转蒸发仪旋干并保存；

(5)人参皂苷Rb₃的纯化

步骤(4)获得的人参皂苷Rb₃，用40%甲醇水溶液溶解后作为样品备用；称取总皂苷质量35倍的ODS硅胶作为分离胶，甲醇装柱；先加入两个柱体积的40%甲醇水溶液，再用滴管沿着柱内壁加入备用的样品；用甲醇与水体积比为2:3,9:11,11:9,13:7,3:1的混合溶剂依次进行梯度洗脱，采用薄层色谱法检测，收集、合并与人参皂苷Rb₃阳性对照品Rf值相同的流份溶液，用旋转蒸发仪旋干并保存。

2.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rb₃的制备方法，其特征在于：薄层色谱法检测的步骤包括：利用薄层层析板Silica gel 602F₂₅₄，以体积比为7:15:0.5的甲醇-二氯甲烷-三乙胺混合溶剂作为展开剂，用5％硫酸-乙醇溶液显色。

3.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rb₃的制备方法，其特征在于：步骤(2)超声的时间为20min。

4.根据权利要求1所述的一种人参皂苷Rb₃的制备方法，其特征在于：旋转蒸发仪的水浴温度为50℃。