[发明专利]一种苛养菌分离检测方法

说明书

技术领域：本发明属医疗科学技术领域，涉及一种提高苛养菌分离检测的方法。 

背景技术：苛养菌主要包括肺炎链球菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌，是引起社区呼吸道感染和院内感染的主要病原菌。苛养菌分离检测数据的高低对治疗呼吸道感染疾病，合理使用抗生素和减低细菌的耐药性，乃至提高治疗疾病的效果具有不重要意义。现有技术中，苛养菌分离检测的方法主要是：一、接种绵羊血或巧克力平板，分离肺炎链球菌，该步骤由于痰标本和咽拭子受口腔正常菌群污染的影响，肺炎链球菌的分离检测率极低； 

二、接种绵羊血或巧克力平板，分离化脓性链球菌，该步骤由于痰标本和咽拭子受口腔正常菌群污染的影响，化脓性链球菌的分离检测率极低； 

三、接种贴万古霉素绵羊血或巧克力平板，分离流感嗜血杆菌，该步骤利用贴万古霉素，虽然可以抑制正常的菌群，但同时会杀死标本中金黄色的葡萄球菌、肺炎链球菌及化脓性链球菌，成本较高； 

四、接种绵羊血或巧克力平板，分离卡他莫拉菌，该步骤同样由于痰标本和咽拭子受口腔正常菌群污染的影响，卡他莫拉菌的检出率极低。 

五、接种麦康凯平板，分离阴性杆菌。 

上述这种方法对苛养菌的分离检测率低，不便于观察药敏效果，不利于及时合理使用抗生素，减低细菌耐药性，以致使治疗呼吸道感染疾病的效果差。 

发明内容：本发明的目的是提供一种新的苛养菌分离检测方法，用以有效地克服现有技术所存在的上述弊端。本发明的目的是在现有技术的基础上改进实现的，它包括接种麦康凯平板，分离阴性杆菌，其特征在于：一、分离肺炎链球菌一步，在接种绵羊血或巧克力平板上贴庆大霉素纸片； 

二、分离化脓性链球菌一步，在接种绵羊血或巧克力平板上贴复方新诺明纸片和杆菌肽鉴定纸片； 

三、分离流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌一步，在贴万古霉素绵羊血或巧克力平板第一区还贴洁霉素、杆菌肽药敏纸片成倒三角形； 

该方法在分离肺炎链球菌时，利用肺炎链球菌耐庆大霉素原理，有效抑制其他正常菌群，从而提高肺炎链球菌的分离，同时如果有革兰氏阴性杆菌，还可初步观察标本的直接药敏效果；在分离化脓性链球菌时，利用化脓性链球菌耐复方新诺明原理，有效抑制其他正常菌群，从而提高化脓性链球菌的分离检测，同时杆菌肽对化脓性链球菌其鉴定作用，可快速及时检出痰标本或咽拭子中的化脓性链球菌；在分离流感嗜血杆菌或卡他莫拉菌时，万古霉素、洁霉素、杆菌肽同时抑制革兰氏阳性杆菌，又不影响二区、三区细菌生长，在提高流感嗜血杆菌或卡他莫拉菌分离检测的同时，还有利于提高其他病原菌的检测，同时还可观察标本的直接药敏效果，并 根据洁霉素的药敏效果，推断其他大环内酯类抗生素的应用。该方法在检测选择苛养菌的同时，可提前24小时观察标本的直接药敏效果，对指导合理使用抗生素，提高治疗效果及抢救危重患者具有非常重要的意义。 

具体实施方式：下面将通过实施例对本发明进行详细说明： 

实施例：取合格的痰样本，用1％痰标本消化液消化1小时后，接种两块绵羊血平板，其中一块贴庆大霉素纸片，以下称1^#平板，另一块贴复方新诺明纸片和杆菌肽鉴定纸片，以下称2^#平板；接种一块巧克力平板，在第一区贴万古霉素、洁霉素和杆菌肽纸片成倒三角形，以下称3^#平板；接种一块麦康凯平板，以下称4^#平板，将四块平板分别放入CO₂培养箱培养，待培养好后，取1^#平板，检测分离肺炎链球菌，如果有革兰氏阴性杆菌，可初步观察标本的直接药敏效果；取2^#平板，通过杆菌肽对化脓性链球菌进行鉴定，并实施检测分离；取3^#平板，检测分离流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌，并观察标本的直接药敏效果；取4^#平板，检测分离阴性杆菌，即实现本发明苛养菌的分离检测。