[发明专利]一种内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒及方法

权利要求书

1.一种内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于包括：（1）抗内脂素抗体和包含内脂素全蛋白局部或者整个肽段且能与所述抗内脂素抗体发生特异性抗原-抗体反应的内脂素多肽；（2）反应剂和检测剂，用于通过竞争抑制性酶联免疫检测待测样品中内脂素存在以否并确定其含量的物质。

2.根据权利要求1所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述内脂素多肽为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽。

3.根据权利要求2所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括标准内脂素多肽，所述标准内脂素多肽是由内脂素多肽与KLH钥蓝蛋白螯合而成。

4.根据权利要求3所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述标准内脂素多肽通过以下方式制备：用生物素标记内脂素多肽，而后将生物素标记的内脂素多肽置于透析袋中，通过透析出去其中的小分子化合物，再于等摩尔量的KLH钥蓝蛋白在室温避光孵育，并立刻置于含0.1%叠氮钠的1×PBS中透析过夜，而后定量其浓度，冻干保存或在使用时通过倍比稀释制备梯级浓度的标准内脂素多肽。

5.根据权利要求1所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述内脂素多肽标记有生物素，所述反应剂还包括识别生物素标记的链霉亲和素，所述链霉亲和素标记有辣根过氧化物酶。

6.根据权利要求3所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括包被有特异二抗的酶标板，所述特异二抗能与所述抗内脂素抗体发生特异性抗原-抗体反应。

7.一种内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、制备内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，该试剂盒包括：（1）抗内脂素抗体和包含内脂素全蛋白局部或者整个肽段且能与所述抗内脂素抗体发生特异性抗原-抗体反应的内脂素多肽；（2）反应剂和检测剂，用于通过竞争抑制性酶联免疫检测待测样品中内脂素存在以否并确定其含量的物质；

步骤二、通过竞争抑制性酶联免疫检测待测样品中内脂素存在以否并确定其含量。

8.根据权利要求7所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测方法，其特征在于：所述内脂素多肽为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽。

9.根据权利要求7所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测方法，其特征在于，该试剂盒还包括标准内脂素多肽，所述标准内脂素多肽是由内脂素多肽与KLH钥蓝蛋白螯合而成，包括如下步骤：用生物素标记内脂素多肽，而后将生物素标记的内脂素多肽置于透析袋中，通过透析出去其中的小分子化合物，再于等摩尔量的KLH钥蓝蛋白在室温避光孵育，并立刻置于含0.1%叠氮钠的1×PBS中透析过夜，而后定量其浓度，冻干保存或在使用时通过倍比稀释制备梯级浓度的标准内脂素多肽。

10.根据权利要求1所述的内脂素的竞争抑制性酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒还包括包被有特异二抗的酶标板，所述特异二抗能与所述抗内脂素抗体发生特异性抗原-抗体反应；所述内脂素多肽标记有生物素，所述反应剂还包括识别生物素标记的链霉亲和素，所述链霉亲和素标记有辣根过氧化物酶。