[发明专利]一种地中海贫血筛查试剂及制备方法和检测筛查方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种地中海贫血筛查试剂，本发明还涉及一种制备该地中海贫血筛查试剂的方法。本发明还涉及一种采用该试剂检测筛查地中海贫血的方法，属于生物化学、物理、检验诊断试剂领域。

背景技术

地中海贫血（Thalassemia）是一组遗传性溶血性疾病，其特点是血红蛋白的珠蛋白肽链中有一种或偶尔几种的合成受到抑制。在我国多见于南方沿海地区如广东、广西、湖南、湖北、四川、浙江、福建和台湾等地区。这种疾病是由于红细胞内的血红蛋白数量和质量的异常造成红细胞寿命缩短的一种先天性贫血。地中海贫血主要分成两大类，包括α地中海贫血和β地中海贫血，这两类地中海贫血有四个等级，包括重型、中间型、轻型以及基因携带者。现在基因（PCR）确诊地中海贫血的试验操作复杂，费用昂贵，不利于普及。而一管法筛查地中海贫血试剂操作繁琐，且要离心沉淀，完全是手工操作，效力低下。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种使用方便，价格相对便宜，检测效果好的地中海贫血筛查试剂。

本发明的另一个目的是提供一种制备该地中海贫血筛查试剂的方法。

本发明另一个目的是提供一种地中海贫血的检测筛查方法。

为了达到上述目的，本发明采用以下方案：

一种地中海贫血筛查试剂，其特征在于包括有试剂A和试剂B，所述的试剂A由母液用蒸馏水稀释30倍所得，所述的试剂B由母液用蒸馏水稀释10倍所得，其中所述的母液按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种地中海贫血筛查试剂，其特征在于所述的A液按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种地中海贫血筛查试剂，其特征在于所述的B液按重量百分比由以下组分组成：

如上所述的一种地中海贫血筛查试剂，其特征在于所述的样本稀释液为医用生理盐水。

制备如上所述的地中海贫血筛查试剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

在洁净的玻璃容器中按比例加入分析纯氯化钠，磷酸二氢钾，磷酸氢二钠含十二个结晶水，加入部分蒸馏水，然后搅拌溶解，最后加入余量的蒸馏水，制得母液，分别取母液各一份，蒸馏水稀释30倍即得试剂A，稀释10倍即得试剂B。

一种地中海贫血的检测筛查方法，其特征在于采用权利要求1-3任一种试剂，所述的在试剂全自动生化分析仪使用，试剂A及试剂B参数相同：主波长：600nm，方法：终点法，方向：上升反应，K值：10000，样品量为15ul，试剂量为200ul，反应时间为5分钟，反应温度为37℃。

如上所述的制备方法，其特征在于各步骤均在无菌车间里进行。

本发明中组分的分子式、性状及产地：

（1）分析纯氯化钠分子式：NaCl  分子量58.44

无色结晶性粉末，无嗅微有潮解性，溶于水，不溶于乙醇（广州番禺力强化工厂）

（2）磷酸二氢钾分子式：KH₂PO₄分子量136.09

无色结晶，无嗅微有潮解性，溶于水，不溶于醇（广州化学试剂厂）

（3）磷酸氢二钠（含12结晶水）分子式Na₂HPO₄.12H₂O分子量358.14

无色结晶性，无嗅微有潮解性，溶于水，在干燥空气中易风化（广东台山粤桥化工厂）

本发明原理：

本发明利用地中海贫血患者与正常人的红细胞膜结构差异，在特定均相氯化钠磷酸盐缓冲溶液中正常红细胞被溶解形成吸光度变化与其溶液中的血红蛋白浓度成反比，在全自动生化分析仪中以600nm处测定其在试剂A及试剂B均相缓冲溶液中的吸光度值，计算出A/B比值，此比值的大小与地中海贫血患者严重程度呈正相关关系，因此可利用此比值检测出地中海贫血患者。

采用本发明试剂检测可大大减低检验人员的工作强度，操作完全自动化，提高了生物安全等级。本发明更有利于普及普通人群、婚前或产前及新生儿对地中海贫血的筛查，预防或减少地中海贫血婴儿的出生率。本发明填补了市场空白的，开发适应全自生化分析仪的操作程序，创造更大的社会效率。

本发明在检验过程中不检测红细胞溶血率，利用全自动生化分析仪600nm波长直接测定红细胞在两种不同氯化钠浓度磷酸盐缓冲溶液中的吸光度，然后直接计算比值。本发明不受患者贫血、黄疸、混浊程度的影响，试剂2～8℃下贮藏质量稳定时间可达一年。