[发明专利]一种系统性红斑狼疮的抗原表位及其应用

说明书

技术领域

本发明属于免疫学诊断技术领域，具体涉及一种系统性红斑狼疮的抗原表位及其应用。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE) 是一种以自身抗体产生和免疫复合物形成为特征的自身免疫性疾病，临床表现为全身症状及多系统多器官受累的症状。我国SLE的发病率为70.1／10万，并且有逐年上升的趋势。SLE的早期诊断、早期治疗是改善预后的关键。然而我国自身免疫性疾病诊断水平较低，并且诊断试剂主要依赖进口，造成诊断费用昂贵，增加了国家和患者的医疗成本，也不利于向基层医院普及。因此，建立稳定、快捷、适合推广的检测方法，是目前亟待解决的问题。

SLE临床诊断标准中包括自身抗体如抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（ds-DNA抗体）和抗Sm抗体检测，但由于特异性和灵敏度的不高，还不是理想的血清学检测指标。如果能够建立SLE特异的“自身抗体谱”检测方法，同时检测多种特异性抗体，提高检出率及准确性,将为SLE的诊断、分类、疗效观察和预后判断提供了可靠的依据,具有重要的临床意义。因此，寻找一种敏感性强、特异性高而又简便易行的血清学检测方法，对系统性红斑狼疮的早期诊断及治疗具有重要意义。

大量自身抗体的出现是自身免疫性疾病的重要特征之一，但由于其发病机制尚不明确，难以直接利用自身抗原检测抗体。抗原表位（epitope）是抗原分子中识别、结合抗体的基础，因此是检测抗体的实际有效组分。以抗原表位肽或其模拟肽（mimotope）作为诊断工具有以下几个优势：1）可以提高诊断的灵敏度和特异性，避免了生物大分子易产生的非特异性结合（Deroo S et al (2001) Comb Chem High Throughput Screen 4: 75 – 115）；2）扩大疾病诊断的范围，对于研究较少或难以体外应用的自身抗原如核酸抗原、多糖抗原、脂类抗原，以模拟肽作为天然抗原的替代物进行诊断，也可以获得与天然抗原表位一致的结果（Bruce G （1997） Proc Natl Acad Sci USA 94：1955 – 1960； Jinaping Q et al (1999) Hyridoma 18(1)：103 – 109）；3）多肽制备、应用的成本低、易于质控。因此，自身抗原表位肽或其模拟肽（Meloen RH et al (2000) J Mol Recognit 13: 352 - 359 ）的获得是制备自身抗体的多肽检测试剂的基础。基于噬菌体肽库技术的抗原表位确定技术，仅需要以患者血清样本为靶标，而无需天然的自身抗原信息，可以实现快速和简便筛选，并且成本低、结果可信度高。噬菌体肽库技术的另一个突出特点是，通过筛选可以同时获得某一疾病特异性的多个抗原表位肽，它们可能代表了天然抗原的主要免疫显性基团。天然生物大分子抗原通常由多个抗原表位组成，其中有一些在免疫反应中起着主要作用，被称为“免疫显性基团”，针对完整抗原的抗体主要是针对这些表位的多种“单克隆抗体”组成。以SLE患者血清样品为靶标，通过噬菌体肽库筛选，获得SLE特异性的抗原表位肽，是获得新型诊断试剂的基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种系统性红斑狼疮的抗原表位。

本发明的目的还在于提供上述抗原表位的核苷酸序列。

本发明的目的还在于提供一种检测系统性红斑狼疮的试剂盒。

本发明的目的还在于提供系统性红斑狼疮的抗原表位在制备诊断系统性红斑狼疮的药物中的用途。

发明人人从10例SLE患者血清中制备和纯化得到IgG，然后以线性十二肽库与抗体孵育，经筛选获得了与抗体特异结合的噬菌体克隆。之后通过ELISA确定阳性噬菌体克隆，测定阳性噬菌体克隆展示肽序列。化学合成其中的一个表位肽，命名为SLEP, 通过ELISA检测与患者血清的反应情况，表明其能特异的与患者血清中的IgG结合，而不与健康人血清反应。

一种系统性红斑狼疮的抗原表位，该抗原表位为多肽，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示。

编码上述系统性红斑狼疮的抗原表位的核苷酸序列。

一种检测系统性红斑狼疮的试剂盒，该试剂盒包括：权利要求1所述多肽，权利要求1所述多肽的抗体，固相酶标板，牛血清白蛋白，辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG，四甲基联苯胺。 

所述系统性红斑狼疮的抗原表位在制备诊断系统性红斑狼疮的药物中的用途。