[发明专利]利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法及其产品

说明书

技术领域

本发明属于一种消毒方法，具体涉及利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法，还涉及用该方法制得的产品。

背景技术

异体和异种皮肤是临床上替代自体皮肤治疗大面积烧伤的主要敷料，但异种和异体皮肤抗原性强，特别是新鲜皮肤，还带有大量的菌污染，皮肤移植后的强烈免疫排斥反应往往会导致皮肤过早的坏死。中波紫外线(UltravioletRadiationB，UVB)，是到达地球表面的紫外线中引起机体生物学效应的主要光谱，波长280-320nm。经研究表明311nm的窄谱中波紫外线（NB-UVB）在治疗银屑病具良好单一性，红斑反应、色素沉着轻微，且疗效可靠，可产生最佳治疗效果，单纯NB-UVB 照射治疗银屑病有效率可达73.3%，而290-300nm 波长的UVB 可致皮肤灼伤( 红斑效应和角质形成细胞坏死)，而无治疗作用。目前，利用中波紫外线对离体皮肤消毒还处理空白，如何在降低离体皮肤免疫原性的同时，带菌量少，又可保持离体皮肤活性较高。是皮肤移植中亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法，操作简单方便，条件易于控制，对离体皮肤活性影响较小，并能有效控制离体皮肤的带菌量和降低免疫原性。

为实现上述发明目的，技术方案为：

利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法，将离体皮肤用电压为180~240V，照射剂量为100~400J/cm²的中波紫外线照射。

优选的，所述离体皮肤置于温度为0~25℃，湿度为40-70%的环境下。

更优选的，所述离体皮肤置于温度为25℃，湿度为60%环境下，用电压为220V，照射剂量为300J/cm的中波紫外线照射。

更优选的，波紫外线照射前还包括离体皮肤预处理，具体为将离体皮肤制成厚度为1.0mm的材料。

本发明中离体皮肤可以选用临床上可接受的皮肤，优选的离体皮肤为离体猪皮，具有来源广泛，成本低的特点。

本发明的目的之二在于提供由中波紫外线对离体皮肤消毒制备的离体皮肤，其免疫原性低，带菌量少，皮肤活性高。

为实现上述发明目的，技术方案为：

所述利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法制备的离体皮肤。

本发明的有益效果在于：本发明公开的利用中波紫外线对离体皮肤消毒的方法，操作简单，条件易于控制，对离体皮肤活性影响较小，并且制得的离体皮肤带菌量少，免疫原性低，能用于临床上替代自体皮肤治疗大面积烧伤的敷料，具有广泛的应用前景。

具体实施方式

以下将参照实施例，对本发明的优选实施例进行详细的描述。优选实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

一、消毒方法

利用中波紫外线对立体猪皮进行消毒的方法，具体步骤如下：

A 制皮

取新鲜猪皮，然后制成厚度为0.8-1.0mm的离体猪皮，切块，备用；

B 照射

将步骤A处理的离体猪皮放置于中波紫外线（UVB）恒温箱，并保持猪皮与UVB灯管的距离小于20cm，按照表1设计的正交试验对猪皮进行处理，得消毒猪皮。取新鲜猪皮，未经UVB处理皮为阴性对照，以 25kGYCo^60照射为阳性对照。25kGYCo^60表示用25kGY钴-60的剂量，在辐射加工过程中，受照物质单位质量所吸收的能量，国际单位定义为戈瑞（Gy），1戈瑞表示1千克（Kg）物质吸收1焦耳（J）能量，1 Gy＝1 J/ Kg；辐射加工中常用千戈瑞（KGy）表示吸收剂量。

表1.正交实验法UVB照射猪皮因素与水平表

 　  备注：V—电压；T—温度；S—湿度；Z—照射剂量

处理后测定皮肤各指标，分别为UVB对皮肤表皮细胞刺激淋巴细胞增殖抑制率（YZL）；UVB照射对皮肤LC数量下降百分率（LC）；UVB对皮肤带菌量细菌下降百分率（XJ）和UVB照射后的皮肤活性百分率（HX）。

二、淋巴细胞增殖实验

1）淋巴细胞的分离

将淋巴细胞分离液（购自上海研拓生物科技有限公司）与健康人全血按体积比为1:1先后加入离心管，在温度为25℃、转速为3000rpm条件下离心20分钟；吸取中间层淋巴细胞层，并用淋巴细胞分离液清洗3次，然后进行活细胞计数，并用质量分数为10%CS-RPMI 1640调整细胞浓度至l×l0⁶ cells/ml。