[发明专利]检测牛流行热病毒的核苷酸序列和试剂盒无效
申请号: | 201210219927.5 | 申请日: | 2012-06-27 |
公开(公告)号: | CN102719566A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 李海花;杨丙田;张向东;葛思娟;杜小迪 | 申请(专利权)人: | 北京森康生物技术开发有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人: | 赵晓丹 |
地址: | 101400 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 流行 病毒 核苷酸 序列 试剂盒 | ||
1.一组检测牛流行热病毒的核苷酸序列,其特征在于:所述核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:3所示,其中序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2分别为检测牛流行热病毒的正义引物和反义引物,序列SEQ ID NO:3为检测牛流行热病毒的荧光探针。
2.根据权利要求1所述的检测牛流行热病毒的核苷酸序列,其特征在于:所述荧光探针序列SEQ ID NO:3的5’端标记报告荧光基团FAM,3’端标记淬灭荧光基团MGB。
3.一种检测牛流行热病毒的试剂盒,其特征在于,由以下组分组成:
1)裂解液;
2)RT-PCR反应液,其中包括:RT缓冲液、MgCL2 、 dNTP、正义引物 、反义引物和荧光探针;
3)反转录酶M-MLV;
4)RNA酶抑制剂;
5)Taq DNA聚合酶;
6)DEPC水;
7)阴性对照:牛流行热病毒阴性牛组织样品;
8)阳性对照:为体外转录的非感染性RNA片段,其对应的DNA序列为序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸序列;
其中,正义引物为序列表SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,反义引物为序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列,荧光探针为序列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列,其5’端标记报告荧光基团FAM,3’端标记淬灭荧光基团MGB。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述RT-PCR反应液包括:1×RT缓冲液、1.0mM MgCL2、0.05mM dNTP、0.4μM正义引物、0.4μM反义引物和0.2μM荧光探针。
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