[发明专利]中药凉茶及草药饮料产品质量控制色谱指纹图谱构建方法有效
申请号: | 201210220823.6 | 申请日: | 2012-06-29 |
公开(公告)号: | CN102706983A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 陈波;李彬;王华;吴青;李媛 | 申请(专利权)人: | 湖南师范大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/08;G01N30/14 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所 43205 | 代理人: | 宁星耀;许伯严 |
地址: | 410081 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中药 凉茶 草药 饮料 产品质量 控制 色谱 指纹 图谱 构建 方法 | ||
1. 一种中药凉茶及草药饮料产品质量控制色谱指纹图谱构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)样品前处理;选取以下方法中的一种处理样品:
①冷冻干燥-提取法:取中药凉茶或草药饮料中草药饮料,-40℃以下冷冻干燥至干,取所得固体,加入与原所取凉茶或饮料体积比为1-9︰3的有机溶剂,超声、振荡或回流提取,6 000-13 000 rpm条件下离心5-15 min,取上清液,N2吹干;残渣按5-30︰1的浓缩比加入有机溶剂或色谱流动相,超声或振荡提取复溶;
所述提取时超声的功率≥20 W,频率≥25 KHz,时间为10-120 min;
所述提取时振荡的温度为20-55 ℃,频率≤300 rpm,时间为0.5-10 h;
所述回流的温度为溶剂沸点,回流时间为0.5-5 h;
所述复溶时超声功率≥20 W,频率≥25 KHz,时间为1-3 min;
所述复溶时振荡频率为100-2 000 rpm,温度为室温,时间为1-3 min;
所述浓缩比为原所取中药凉茶或草药饮料与有机溶剂或色谱流动相的体积比;
②热蒸发干燥-提取法:取中药凉茶或草药饮料,在55-100℃下热蒸发干燥至干,取所得固体,加入与原所取凉茶或饮料体积比为1-9︰3的有机溶剂超声、振荡或回流提取,6 000-13 000 rpm下离心5-15 min,取上清液,N2吹干;残渣按5-30︰1的浓缩比加入有机溶剂或色谱流动相,超声或振荡提取复溶;
所述提取时超声的功率≥20 W,频率≥25 KHz,时间为10-120min;
所述提取时振荡的提取温度为20-55℃,频率≤300 rpm,时间为0.5-10 h;
所述回流的温度为溶剂沸点,回流时间为0.5-5 h;
所述复溶时超声功率≥20 W,频率≥25 KHz,时间为1-3 min;
所述复溶时振荡频率为100-2 000 rpm,温度为室温,时间为1-3min;
所述浓缩比为原所取中药凉茶或草药饮料与有机溶剂或色谱流动相的体积比;
③固相萃取法:将固相萃取小柱用1倍柱管体积量的甲醇活化,然后用1倍柱管体积量的水平衡,取中药凉茶或草药饮料上样,1倍柱管体积量的水洗上样后的固相萃取小柱除杂,抽干或上样后直接抽干,取2-4倍柱床体积量的有机溶剂洗脱,所得洗脱液用N2吹干,残渣按5-30︰1的浓缩比加入有机溶剂或色谱流动相,超声或振荡提取复溶;
所述浓缩比为原所取中药凉茶或草药饮料与有机溶剂或色谱流动相的体积比;
所述超声的功率≥20 W,频率≥25 KHz,时间为1-3 min;
所述复溶时振荡频率为100-2 000 rpm,温度为室温,时间为1-3min;
(2)HPLC指纹图谱分析。
2.根据权利要求1所述的中药凉茶及草药饮料产品质量控制色谱指纹图谱构建方法,其特征在于,所述有机溶剂为甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、乙醇、四氢呋喃、异丙醇、乙醚、二氯甲烷中的一种。
3.根据权利要求1或2所述的中药凉茶及草药饮料产品质量控制色谱指纹图谱构建方法,其特征在于,所述色谱流动相为乙腈与水的混合物或甲醇与水的混合物。
4.根据权利要求1或2所述的中药凉茶及草药饮料产品质量控制色谱指纹图谱构建方法,其特征在于,固相萃取法中,所述固相萃取小柱为C18、氰基或氨基固相萃取小柱。
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