[发明专利]一种卵裂球单细胞的固定方法无效
申请号: | 201210221309.4 | 申请日: | 2012-06-30 |
公开(公告)号: | CN102706716A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 孙莹璞;李刚;戴善军;郭艺红;金海霞;辛志敏;宋文妍;石森林;彭兆锋 | 申请(专利权)人: | 郑州大学第一附属医院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人: | 聂孟民 |
地址: | 450052 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 卵裂 单细胞 固定 方法 | ||
1.一种卵裂球单细胞的固定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将单个卵裂球在磷酸盐缓冲液中漂洗,得漂洗的卵裂球细胞;
(2)将步骤(1)所得卵裂球细胞移至载玻片的标定区域内,标定区域内滴加有1-2μL的吐温20和盐酸的混合溶液,将载玻片置于35-38℃的显微镜热台上,液体自然蒸发过程中观察细胞膨胀、细胞膜破裂、细胞核游离,若细胞膜未完全破裂,可重复滴加吐温20和盐酸的混合溶液;
(3)待在显微镜下观察到步骤(2)中细胞的细胞膜破裂、细胞核游离后,停止滴加吐温20和盐酸的混合溶液,室温15-30℃下干燥后,再在载玻片上滴加甲醇和冰醋酸的混合溶液,除去残留的胞浆。
2.根据权利要求1所述的卵裂球单细胞的固定方法,其特征在于,所述的吐温20和盐酸的混合溶液为10μL质量浓度0.01%的吐温20、10μL摩尔浓度0.01N的盐酸和10μL水混合的混合溶液。
3.根据权利要求1所述的卵裂球单细胞的固定方法,其特征在于,所述的甲醇和冰醋酸的混合溶液为甲醇和冰醋酸按照体积比3:1的比例混合的混合溶液。
4.根据权利要求1所述的卵裂球单细胞的固定方法,其特征在于,所述的吐温20和盐酸的混合溶液的温度为35-38℃。
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