[发明专利]新的猪肺炎支原体菌株及其疫苗组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种新的猪肺炎支原体以及疫苗组合物，属于兽用疫苗领域。

背景技术

猪肺炎支原体是猪支原体肺炎的病原体。猪支原体肺炎是猪的一种慢性消耗性呼吸道病，临床感染率极高。该疾病导致持续几周的持续性咳嗽、被毛失去光泽、生长迟缓和外观不壮实。猪群一旦感染猪肺炎支原体，便难以清除，不仅严重影响猪群的生长发育，用药量增加，而且容易继发感染PRRSV（猪蓝耳病病毒）、PCV（猪圆环病毒）等，从而导致多种疫苗接种失败。猪肺炎支原体作为猪呼吸道病综合征的重要病原之一，每年的经济损失估计在2亿～2.5亿美元之间。直接或间接对养猪业造成了巨大的经济损失。

目前，世界上预防和控制猪肺炎支原体感染的有效的手段是对猪群进行疫苗免疫。大多数疫苗均为含有佐剂的全菌体灭活疫苗，通常情况下这些疫苗均能提供较好的保护作用，如改善临床症状，减少肺损伤，减少因猪肺炎支原体感染用药，提高生长效率等。目前，广泛应用的疫苗是以猪肺炎支原体J株或P株作为抗原的灭活疫苗，使用J株或P株制备的疫苗在全球很多国家销售和使用。然而，由于猪群中的流行株的变异，在临床上仍能观察到不同的猪群疫苗免疫后免疫效果方面存在差异，即存在一些免疫效果欠佳的群体。临床上观察到的这些差异原因是由于猪群中的流行株与疫苗株间存在抗原差异造成的（Villarreal等，BMC Veterinary Research 2012,8:2）。有研究表明，目前猪群中流行的毒株在基因水平、蛋白水平以及毒力方面与疫苗使用的猪肺炎支原体J株或P株存在较大的差异（如文献Stakenborg 等,Vet Microbiol 2005,109:29-36；Calus等，Vet Microbiol 2007,120:284-91.；Vicca等Vet Microbiol 2003,97:177-190.；Meyns等，Prev Vet Med 2004,66:265-275中所报道的内容）。上述文献资料表明，疫苗使用的猪肺炎支原体J株对猪支原体肺炎的临床预防和治疗效果欠佳。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种经分离鉴定为免疫原性更好的猪肺炎支原体毒株，并以该毒株为抗原研制保护效果更好的疫苗。

即发明人意外发现一株猪肺炎支原体毒株，该毒株具有良好的免疫原性，与当前广泛使用的猪支原体肺炎疫苗株J株相比，具有更好的免疫原性，制备成疫苗后有更好的免疫保护效果。

即，本发明的第一方面是提供一种猪肺炎支原体菌株，菌株名称为HN0613株，保藏编号为CCTCC M2012230，保藏单位为位于中国武汉的中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC），保藏日期：2012年6月13日。

本发明还提供了上述猪肺炎支原体HN0613株制备的猪肺炎支原体抗原与含有该猪肺炎支原体抗原的猪支原体肺炎疫苗。

优选地，本发明所述的猪支原体肺炎疫苗中，猪肺炎支原体抗原为灭活的猪肺炎支原体HN0613株的免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，或任何其它含猪肺炎支原体HN0613株免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位抗原。更优选地，所述的猪肺炎支原体抗原为灭活的猪肺炎支原体全菌抗原（即，灭活的猪肺炎支原体HN0613株）。

优选地，本发明所述的猪支原体肺炎疫苗中，猪肺炎支原体抗原的含量为所述的灭活的猪肺炎支原体HN0613株抗原抗原的含量为10⁷～10⁹CCU／头份（以每头份2ml计，下同），即灭活的猪肺炎支原体抗原在灭活前猪肺炎支原体含量为10⁷～10⁹CCU／头份（2ml）；更优选地，所述的灭活的猪肺炎支原体HN0613株抗原含量为灭活前1~2×10⁸CCU/头份；最优选地，灭活的猪肺炎支原体HN0613株的含量为灭活前2×10⁸CCU／头份（2ml）。

优选地，本发明所述的猪支原体肺炎疫苗中，还包括疫苗佐剂，所述佐剂指包含一种或多种物质的组合物，能够增强猪肺炎支原体的免疫原性和功效的物质。优选地，本发明所述的疫苗佐剂为Gel 01（法国SCIPPIC）、氢氧化铝胶、矿物油、可代谢油、卡波姆（Carbomer）、蜂胶、ISA206（法国SCIPPIC）、ISA760VG（法国SCIPPIC）的一种或几种的组合。更优选地，本发明所述的疫苗佐剂为卡波姆（Carbomer）（商品名Carbopol）、Gel 01（法国SCIPPIC）、铝胶；最优选地，发明所述的疫苗佐剂为Gel 01（法国SCIPPIC）。