[发明专利]抑血管生成素的药物用途

权利要求书

1.抑血管生成素的药物用途，其特征在于，抑血管生成素作为活性成份制备抗炎药物的应用。

2.如权利要求1所述的抑血管生成素的药物用途，其特征在于，作为抗炎药物活性成份的抑血管生成素采用还原性SDS-PAGE法测定显示为两条带，分别称α链和β链，分子量分别为12000～22000道尔顿、9000～19000道尔顿，其中，α链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，β链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.如权利要求2所述的抑血管生成素的药物用途，其特征在于，作为抗炎药物活性成份的抑血管生成素经双向电泳后会分别产生与所述α链和β链对应的异构体各三个。

4.如权利要求1至3任一项抑血管生成素的药物用途，其特征在于，作为抗炎药物活性成份的抑血管生成素的制备方法包括如下步骤：

（a）将尖吻蝮蛇粗毒溶解于缓冲液中，其中蛇毒与缓冲液的体积比为1～2︰10，离心得到上清液，这里所用的缓冲液是pH 7.0～9.0， 0.01～0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液，离心次数2次，离心速度为4000r/min，每次离心15min；

（b）将所得上清液过二乙胺乙基阴离子交换层析柱进行层析，得到抑血管生成素粗溶液，层析具体为：层析pH 6.0～9.0的0.0l～0.05mol/L的Tris-HCl缓冲液和0.05～0.6mol/L NaCl溶液作为洗脱液进行线性梯度洗脱，洗脱时间为1440min，洗脱流速5ml/min；

（c）将杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体与亲和层析载体偶联，制备得免疫亲和层析柱，这里的亲和层析柱载体为4B琼脂糖凝胶、二乙氨基葡聚糖凝胶、羧甲基葡聚糖凝胶中的任意一种；

（d）用所得免疫亲和层析柱纯化步骤（b）所得抑血管生成素粗溶液，以洗脱缓冲液洗脱，收集得到抑血管生成素，所用洗脱缓冲液为pH2.0～4.0、0.01～0.03 mol/L的Gly-HCl缓冲液。