[发明专利]一种西地那非分子印记膜电化学传感器的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种西地那非分子印记膜电化学传感器(MIES)的制备方法。

背景技术

枸橼酸西地那非是第一个口服治疗阳痿的药品，需在医生指导下使用。国家药品监督管理局规定所有含枸橼酸西地那非的食品均不合法，它与硝酸甘油药物有绝对的禁忌症，特别是对于患有高血压心绞痛而服用硝酸甘油的患者，一旦长期服用会造成血压叠加下降，对生命安全造成严重威胁。目前一些不法生产企业在保健食品、中成药中添加极少量的枸橼酸西地那非，使其具有抗疲劳、补肾壮阳等作用，但为了逃避法律的制裁并没有明示产品的潜在危害。为保证广大消费者的身体健康，规范保健食品市场，建立一个灵敏性高、特异性强的检验枸橼酸西地那非的检测方法是非常必要而又迫切的问题。

目前各种新型检测分析仪器，特别是带有质谱检测器的气相色谱和液相色谱在适用性和灵敏度方面都有很大的提高。但由于保健食品、中成药品中违禁添加的药物成分多且含量极低，复杂基质成分间（尤其是复方中药成分）相互干扰等在，导致目前各种检测方法大部分存在样品制备方法繁杂、缺乏选择性等问题，因此对于功能保健食品和药品中违禁药物检测新技术的研究具有极为重要的意义。

电化学传感器是一种重要的电子器件，因其设计简单、灵敏度高、价格低廉、可实现人体检测、可满足临床诊断、环境分析、食品分析和产品检测需要等优点，越来越受到人们的关注。

分子印记属于超分子化学中主客体化学范畴，是源于高分子化学和材料化学等学科的一门综合学科。分子印记技术是制备具有特异选择性或专一选择性聚合物的技术。其最显著的三大特点为：构效预定性，特异识别性和广泛适用性。

目前电聚合分子印记传感器敏感膜具有一定报道，用电聚合方法制备西地那非分子印记敏感膜传感器未见报道。用分子印记方法富集检测保健品中违禁添加的西地那非已有文献报道。丁美娟等利用Fe₃O₄作为磁性材料，研究出了一种磁性分子印记技术用来检测中成药中的西地那非及伐地那非含量，等人利用固相萃取技术研究了一种在水溶液中即可检测血浆中西地那非含量的方法。

保健品特别是中药类保健品由于自身成分的复杂性，以及添加违禁药物种类的多样性和未知性等问题，对其含有西地那非的分析检测提出了更高的要求。已有文献报道的检测方法有：HPLC、毛细管电泳法、LC-MS等。这些传统的方法虽然也能实现对西地那非的测定，但往往由于样品基质复杂而需要经过繁琐的样品前处理，这大大影响了目标物检测的准确性和快捷性。结合分子印记技术的优良选择性进行样品前处理可实现痕量目标物的快速富集。曾有报道以分子印记技术结合传统分析方法检测复杂样品中的西地那非，虽然大大提高了检测的灵敏度和准确性但仍然面临样品处理复杂、耗时的缺点。电化学传感器最大的优势在于灵敏度高、方便快捷，可以实现实时检测。传统的电化学检测多数局限于本身具有电化学活性的待测物，与分子印记相结合的电化学传感器有望突破传统的局限，可通过待测目标物与特异性孔穴结合阻塞探针分子的通路产生电化学响应。但电聚合到电极上的分子印记层多为不导电或弱导电物质，大大影响了传感器的灵敏度。

发明内容

本发明的目的是提供一种西地那非分子印记膜电化学传感器的制备方法，该法首次结合电化学传感器与分子印记技术的优点构筑西地那非分子印记电化学传感器，实现对保健品、药品中违禁添加西地那非的快速检测，它不仅能维护广大消费者的合法权益，而且能更好地保障他们的身体健康安全，从而使广大消费者在对补肾壮阳类中药保健品的选购方面具有更加清晰的认识，这对完善我国药事管理与法规，规范药品生产企业的行为，净化中药保健品市场具有极为重要的推动作用。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种西地那非分子印记膜电化学传感器的制备方法，其包括以下步骤：

a)电极预处理：将玻碳电极抛光后清洗；

b)分子层层自组装修饰电极：将预处理后的电极浸入到含PDDA的水溶液中，进行静电吸附后用冲洗干净并吹干；再将其浸入至带负电的氧化还原石墨烯PSS-RGO溶液，浸渍后洗净、吹干；继续浸入到带正电的氧化还原石墨烯PDDA-RGO溶液中，浸渍后洗净、吹干；重复前述浸入带负电的氧化还原石墨烯PSS-RGO溶液和带正电的氧化还原石墨烯PDDA-RGO溶液的步骤，以每RGO^-/RGO⁺为一层，重复浸渍10～20层，得到10～20层RGO的分子层层自组装修饰电极；