[发明专利]在转基因芸苔科和亚麻科植物中生产γ-亚麻酸和/或十八碳四烯酸的方法

权利要求书

1.在芸苔科(Brassicaceae)或亚麻科(Linaceae)转基因植物中生产γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)或十八碳四烯酸(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)和十八碳四烯酸(18:4^{Δ6，9，12，15})的方法，其中转基因植物基于总脂肪酸含量包含至少10％重量的油酸，并且所述方法包括下列步骤：

a)向油料植物中引入核酸序列，所述核酸序列编码报春花属(Primula)物种的Δ6-去饱和酶，并且所述Δ6-去饱和酶优先利用α-亚麻酸而非亚油酸作为底物，

b)在转基因植物中表达该核酸编码的Δ6-去饱和酶，

c)生长并收获植物。

2.根据权利要求1的方法，其中编码报春花属物种的Δ6-去饱和酶的核酸序列选自：

a)具有SEQ ID NO：3所示序列的核酸序列，

b)由于遗传密码的简并性，可衍生自SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的核酸序列，

c)SEQ ID NO：3所示核酸序列的衍生物，其编码在氨基酸水平上与SEQ ID NO：4具有至少40％同源性并具有Δ6-去饱和酶活性的多肽。

3.根据权利要求1或2的方法，其中为了表达权利要求1(a)、(b)和(c)的核酸序列，将权利要求1(a)、(b)和(c)的核酸序列有效地与启动子或终止子或者启动子和终止子连接。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中Δ6-去饱和酶活性导致植物中增加的Δ6-C₁₈-脂肪酸含量。

5.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中Δ6-去饱和酶具有对α-亚麻酸的底物特异性，其比对亚油酸的底物特异性高出大于20倍。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中Δ6-去饱和酶仅接受α-亚麻酸作为其底物并且不转化亚油酸。

7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中不饱和脂肪酸γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)或(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)和(18:4^{Δ6，9，12，15})在油料植物的种子中增加。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中从收获的植物中分离种子。

9.根据权利要求1-8的方法，其中不饱和脂肪酸γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)或(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)和(18:4^{Δ6，9，12，15})以油、脂类的形式或者以游离脂肪酸的形式从芸苔科转基因植物或它们的种子中分离。

10.根据权利要求9的方法，其中油或脂类中存在的不饱和脂肪酸以游离脂肪酸的形式分离。

11.根据权利要求1-10的方法，其中油类、脂类或游离脂肪酸与其它动物、微生物或植物的油类、脂类或脂肪酸混合以得到脂肪酸组合物。

12.根据权利要求1-11的方法，其中将油类、脂类或游离脂肪酸或者脂肪酸组合物添加至食品、饲料、化妆品或药物。

13.经分离的核酸序列，其编码具有Δ6-去饱和酶活性的多肽并且其中编码的Δ6-去饱和酶优先利用α-亚麻酸而非亚油酸作为底物，所述核酸序列选自：

a)具有SEQ ID NO：3所示序列的核酸序列，

b)由于遗传密码的简并性，可衍生自SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的核酸序列，或者

c)SEQ ID NO：3所示核酸序列的衍生物，其编码在氨基酸水平上与SEQ ID NO：4具有至少80％同源性并具有Δ6-去饱和酶活性的多肽。

14.根据权利要求13的经分离的核酸序列，该序列来源于植物。

15.根据权利要求13或14的经分离的核酸序列，该序列来源于报春花科(Primulaceae)。