[发明专利]一种来源于莫哈维芽孢杆菌的低温耐有机溶剂脂肪酶有效

专利信息
申请号: 201210228810.3 申请日: 2012-07-03
公开(公告)号: CN103525783B 公开(公告)日: 2018-07-31
发明(设计)人: 陈苗苗;徐正军;周美凤;常桂芳;许骏 申请(专利权)人: 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司
主分类号: C12N9/20 分类号: C12N9/20;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;C12N15/70;C11D3/386;C02F3/00;C02F3/34;C12P7/64;C10L1/02;C12R1/19;C12R1/07
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 韦东
地址: 200137 上海市浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 来源于 哈维 芽孢 杆菌 低温 有机溶剂 脂肪酶
【权利要求书】:

1.一种来自莫哈维芽孢杆菌的分离的脂肪酶,其特征在于,所述脂肪酶选自:

(1)与SEQ ID NO:2的序列相同性为至少99%的多肽;和

(2)在(1)所述多肽的N末端和/或C末端含有用于促进所述多肽表达、获得自动分泌到宿主细胞外的所述多肽、或利于所述多肽纯化的氨基酸序列的多肽。

2.如权利要求1所述的脂肪酶,其特征在于,所述脂肪酶选自:

(1)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;和

(2)SEQ ID NO:2第29-210位所示的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的脂肪酶,其特征在于,第(2)项所述的用于促进所述多肽表达、获得自动分泌到宿主细胞外的所述多肽、或利于所述多肽纯化的氨基酸序列选自:信号肽、前导肽、末端延伸、谷胱甘肽S-转移酶、麦芽糖E结合蛋白、蛋白A、标签序列和Xa因子或凝血酶或肠激酶的蛋白水解酶位点。

4.如权利要求1所述的脂肪酶,其特征在于,所述脂肪酶来自保藏号为CGMCC 4961的莫哈韦芽孢杆菌。

5.一种多核苷酸序列,选自:

(1)编码权利要求1-4中任一项所述的分离的多肽的多核苷酸序列;和

(2)与(1)所述多核苷酸序列互补的多核苷酸序列。

6.如权利要求5所述的多核苷酸序列,其特征在于,所述多核苷酸序列选自:SEQ IDNO:1所示的多核苷酸序列或其互补序列。

7.一种含有权利要求5-6中任一项所述的多核苷酸序列的表达载体。

8.一种含权利要求7所述的表达载体的细胞。

9.如权利要求8所述的细胞,其特征在于,所述细胞为重组表达细胞。

10.如权利要求8或9所述的细胞,其特征在于,所述细胞是大肠杆菌。

11.一种制备权利要求8-10中任一项所述的细胞的方法,其特征在于,所述方法包括将权利要求8所述的表达载体转化宿主细胞。

12.权利要求1-4中任一项所述的脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述方法包括在适于细胞表达所述脂肪酶的条件下培养权利要求8-10中任一项所述的细胞,从而表达所述脂肪酶。

13.一种组合物,其特征在于,所述组合物含有权利要求1-4中任一项所述的脂肪酶。

14.如权利要求13所述的组合物,其特征在于,所述组合物是在适于细胞表达权利要求1-4中任一项所述的脂肪酶的条件下培养权利要求8-10中任一项所述的细胞而获得的包含所述脂肪酶的发酵液。

15.如权利要求13所述的组合物,其特征在于,所述组合物是洗涤剂。

16.权利要求1-4中任一项所述的脂肪酶、权利要求5-6中任一项所述的多核苷酸序列、权利要求8-10中任一项所述的细胞、或权利要求13-15中任一项所述的组合物在处理污染或制备生物柴油中的用途。

17.如权利要求16所述的用途,其特征在于,所述污染是油性污垢或污水。

18.如权利要求16所述的用途,其特征在于,所述污染是有机溶剂造成的污染。

19.如权利要求18所述的用途,其特征在于,所述有机溶剂选自苯、甲苯和丙酮。

20.一种处理污染的方法,其特征在于,所述方法包括使权利要求1-4中任一项所述的脂肪酶或权利要求13-15中任一项所述的组合物与污垢接触,从而溶解污垢而除去污垢。

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