[发明专利]一种由纤维素酶和碳酸氢钠组成的饲料添加剂、饲料及其应用和鸡球虫病活卵囊疫苗

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种由纤维素酶和碳酸氢钠组成的饲料添加剂、饲料及其应用、和鸡球虫病活卵囊疫苗。

背景技术

鸡球虫病是一种原生动物寄生虫病，由柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫的一种或一种以上引起。它们在鸡的肠道各部位寄生，引起肠道的炎症、出血和鸡的死亡，给养鸡业造成巨大的经济损失。

长期以来，该病的防治以药物为主。由于药物残留影响食品安全和人类健康，加上球虫对药物容易产生抗药性，该病的防治越来越依靠免疫手段。

目前使用的鸡球虫病疫苗主要是活卵囊疫苗，例如先灵葆雅PARACOX和COCCIVAC、加拿大维泰克的IMMUCOX、梅里亚的LIVACOX，其中COCCIVAC和IMMUCOX为强毒活卵囊疫苗。

在制造鸡球虫病活卵囊疫苗时，需要将活的疫苗卵囊从鸡的粪便中分离出来，得到相对纯净的疫苗液。已知固形物的存在影响鸡球虫活卵囊疫苗的外观和内在质量，现有的技术主要采用过滤、离心、超滤等手段除去疫苗液中的固形物。如公开号为 CN102174408A的专利所描述的方法。由于固形物在比重和大小等方面比较接近疫苗卵囊，因而现有技术不容易将固形物全部除去，如何进一步除去疫苗液中的固形物，是一个需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种由纤维素酶和碳酸氢钠组成的饲料添加剂、饲料及其应用、和鸡球虫病活卵囊疫苗。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种饲料添加剂，它由纤维素酶和碳酸氢钠组成。

所述碳酸氢钠与纤维素酶的比例为1克碳酸氢钠：20U的纤维素酶。

纤维素酶和碳酸氢钠在鸡球虫病活卵囊疫苗制备过程中减少疫苗液中固形物含量的应用。

添加的碳酸氢钠与纤维素酶的比例为1克碳酸氢钠：20U的纤维素酶。

纤维素酶和碳酸氢钠在制备鸡球虫病活卵囊疫苗制备过程中用于减少疫苗液中固形物含量的饲料中的应用。

所述纤维素酶酶的添加量为200 —1000 U/kg饲料；添加的碳酸氢钠的数量为每公斤饲料10—50克。添加的碳酸氢钠与纤维素酶的比例为1克碳酸氢钠：20U的纤维素酶。

一种用于鸡球虫病活卵囊疫苗制备过程中的饲料，制备疫苗所用鸡的饲料中包括纤维素酶和碳酸氢钠。

所述纤维素酶酶的添加量为200—1000 U/kg饲料。添加的碳酸氢钠的数量为每公斤饲料10—50克。碳酸氢钠与纤维素酶的比例为1克碳酸氢钠：20U的纤维素酶。

所述纤维素酶为经过包被的饲料纤维素酶。

上述的饲料在鸡球虫病活卵囊疫苗制备过程中减少疫苗液中固形物含量的应用。

一种鸡球虫病活卵囊疫苗，其是以下步骤制成的：

（1）        配制饲料：在常规鸡饲料中添加纤维素酶和碳酸氢钠，所述纤维素酶酶的添加量为200—1000 U/kg饲料。添加的碳酸氢钠的数量为每公斤饲料10—50克。碳酸氢钠与纤维素酶的比例为1克碳酸氢钠：20U的纤维素酶；

（2）        饲喂和接种：将配制的饲料饲喂待接种鸡，自由采食；且给待接种鸡接种球虫弱毒株孢子化卵囊；

（3）        收粪和卵囊分离：接种后96小时，收集鸡的粪便，经60目筛过滤所收集鸡粪，得滤液；离心滤液得到沉淀物；加盐水到该沉淀，搅拌均匀并离心，收集表面部分盐水，其中含有大量卵囊；收集表层盐水后，向其中加入10倍体积的水，搅匀后离心，得到沉淀；向沉淀中再加入水并搅拌离心，如此3次，得到最终沉淀物，加适量水到最终沉淀物中得到疫苗液。

为了最大限度地减少疫苗液中的固形物，现有技术主要采用过滤、离心、沉淀、盐水漂浮、超滤等方法，使用设备包括振动筛、离心机、超滤机等。本发明人意外发现，给制造疫苗所用鸡的饲料中添加纤维素酶和碳酸氢钠可以进一步减少疫苗液中固形物的含量，该饲料用于疫苗生产可提高疫苗质量。上述的纤维素酶可以是单一的纤维素酶，或是纤维素酶与其他酶的复合物。我们发现，当酶的添加量为10，100，400，500，1000，5000 U/kg饲料时，添加的碳酸氢钠的数量为每公斤饲料10—50克时，最终制得的疫苗液中的固形物依次降低。其中添加200—1000U/kg饲料，能降低固形物20—25%。

本发明的有益效果是：该酶和碳酸氢钠的添加能减少疫苗中固形物的含量。

具体实施方式