[发明专利]一种两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法

权利要求书

1.一种两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)两亲性γ-聚谷氨酸接枝产物的合成：

(1a)将γ-聚谷氨酸溶解于溶剂I中，形成10~20g/L的γ-聚谷氨酸溶液；

(1b)将催化剂加入步骤(1a)得到的γ-聚谷氨酸溶液中，催化剂与γ-聚谷氨酸中的谷氨酸单体残基的摩尔比为(12~2.0):1，500~1000r/min反应活化6~12h，形成反应活化液；

(1c)将疏水性修饰物H溶解于溶剂II中，疏水性修饰物H与γ-聚谷氨酸中谷氨酸单体残基的摩尔比为(0.2~1.0):1；

(1d)将步骤(1c)得到的疏水性修饰物H溶液于30~90min内缓慢滴加到步骤(1b)得到的反应活化液中，10~40℃、500~1000r/min条件下反应12~24h，形成反应液；

(1e)将步骤(1d)得到的反应液加入溶剂III中使γ-聚谷氨酸接枝产物沉淀，溶剂III的体积用量为步骤(1d)得到的反应液体积的1~2倍，过滤收集沉淀，先用溶剂III清洗，再用乙醚清洗，反复透析-冻干后得两亲性γ-聚谷氨酸接枝产物；

(2)两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备：

将步骤(1e)得到的两亲性γ-聚谷氨酸接枝产物加入到pH4~7.5、0.1~5mol/L的磷酸盐缓冲液中，两亲性γ-聚谷氨酸接枝产物在磷酸盐缓冲液中的浓度为1~5mg/mL，于25~37℃下震荡12~36h获得准备液，随后利用分子组装的原理，将准备液采用探针型超声仪于冰水浴中超声处理后获得粒径为200~1000nm、粒径多分散系数PDI为0.1~0.5的纳米胶束分散液，再经离心或超滤，冷冻干燥获得两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体。

2.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1a)中，所述γ-聚谷氨酸的分子量为10KDa~1000KDa，其分子量分布系数应在1.1~2.0之间。

3.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1a)中，所述的溶剂I为0.3~1.0mol/L的Na₂CO₃水溶液、0.3~1.0mol/L的NaHCO₃水溶液、磷酸盐缓冲液（PBS）、二甲亚砜（DMSO）、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、N,N-二乙基甲酰胺（DEF）和N,N-二甲基乙酰胺（DMAC）中的任意一种或几种的混合物。

4.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1b)中，所述催化剂为碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）中的任意一种或两种的混合物。

5.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1c)中，所述的疏水性修饰物H为带有非极性或疏水侧链的氨基酸的酯化衍生物、或固醇类化合物、或烷醇、或油醇、或生育酚、或聚（N-异丙基丙烯酰胺）、或糖皮质激素、或阿霉素、或紫杉醇；其中，所述的带有非极性或疏水侧链的氨基酸为或酪氨酸、或色氨酸、或苯丙氨酸、或缬氨酸、或亮氨酸、或异亮氨酸、或脯氨酸、或丙氨酸；所述的固醇类化合物为胆甾醇；所述的烷醇为辛醇、十二烷醇、十四烷醇或十六烷醇；所述的糖皮质激素为地塞米松或氢化可的松。

6.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1c)中，所述的溶剂II为二甲亚砜（DMSO）、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、N,N-二乙基甲酰胺（DEF）、N,N-二甲基乙酰胺（DMAC）和氯仿中的任意一种或几种的混合物。

7.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(1e)中，所述的溶剂III为低级醇或丙酮。

8.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，超声的功率为40~90W，工作2~5s，停1~3s，总时间3~9min。

9.根据权利要求1所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的离心为高速离心，离心力在10000g以上。

10.权利要求1所述方法制备得到的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体。

11.权利要求10所述的两亲性γ-聚谷氨酸纳米药物载体在负载蛋白、DNA以及疏水性药物中的应用。