[发明专利]百合试管小鳞茎诱导方法有效
申请号: | 201210237261.6 | 申请日: | 2012-07-10 |
公开(公告)号: | CN102754598A | 公开(公告)日: | 2012-10-31 |
发明(设计)人: | 邱利文;张国禹;黄桂云;马晓波;胡梅香;吴笛;张海波 | 申请(专利权)人: | 中国长江三峡集团公司;长江三峡生态园林有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人: | 成钢 |
地址: | 443002*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 百合 试管 鳞茎 诱导 方法 | ||
1.一种百合小鳞茎的诱导方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)鳞片低温处理:选择生长健壮百合鳞茎球,洗净后冷藏7-10天;
2)外植体杀菌:将经低温贮藏的百合鳞茎球剥去外面的1-2层鳞片,选取内部鳞片为外植体,将外植体洗净后在超净工作台上先用酒精浸泡、再用氯化汞液消毒,并用无菌水冲洗后将鳞片置于无菌滤纸上,切成方块接种于分化培养基上启动培养;
3)启动培养:将接种有的外植体的分化培养基置于环境条件为温度25±1℃、湿度75±2%、光照14h、光照强度1800-2000lx的恒温培养室内,培养15天后从百合切口处及腹部边沿脱分化产生白色团状愈伤组织,继续通过20天的培养,白色团状愈伤组织上再分化丛生芽;
4)鳞茎诱导培养:当丛生芽长到3-5cm时,将丛生芽分割成小单芽后进行壮苗培养,将健壮幼苗置于10℃光照培养箱内处理14d,再转接到鳞茎诱导培养基中,将转接有健壮幼苗的鳞茎诱导培养基置于恒温培养室内进行试管内百合小鳞茎诱导,通过45天培养诱导出鳞茎。
2.根据权利要求1所述的百合小鳞茎的诱导方法,其特征在于:步骤2)和3)所述的分化培养基配方是:Ms+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉5g/L。
3.根据权利要求1所述的百合小鳞茎的诱导方法,其特征在于:步骤4)中所述的鳞茎诱导培养基的配方是:鳞茎诱导培养基Ms+6-BA0.5 mg/L +NAA0.1 mg/L +蔗糖30 g/L+琼脂粉5 mg/L。
4.根据权利要求1所述的百合小鳞茎的诱导方法,其特征在于:步骤1)选用外植体鳞茎球低温处理时冰箱的冷藏温度为5℃,时间7-10天。
5.根据权利要求1所述的百合小鳞茎的诱导方法,其特征在于:步骤4)中将转接有健壮幼苗的鳞茎诱导培养基置于恒温培养室内进行试管内百合小鳞茎诱导时,恒温培养室内的温度为10±1℃、湿度75±2%、光照14h、光照强度1800-2000lx。
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