[发明专利]一种血站阴性滤除白细胞的洗脱和固定方法及专用过滤器有效
申请号: | 201210237335.6 | 申请日: | 2012-07-04 |
公开(公告)号: | CN102749238A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 李宛泽;张国联 | 申请(专利权)人: | 烟台卓越生物技术有限责任公司 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;C12M1/12 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 阴性 白细胞 洗脱 固定 方法 专用 过滤器 | ||
1.一种血站阴性滤除白细胞的洗脱和固定方法,其特征在于该方法的步骤是:A、将血站采集后的全血经白细胞滤器过滤后,滤器中粘附在滤纸上的白细胞用1#保养液将其洗脱下来,并用过滤器过滤洗脱下来的白细胞;B、将白细胞加入2#保养液置于离心机中分离纯化,2#保养液∶白细胞的体积比=2~5∶1;C、将纯化的白细胞中加入固定液固定,固定液∶白细胞的体积比=1∶30~80;D、将固定后的白细胞根据使用需要调节浓度,或是作为单项指标测试的质控品使用,或是将其加入含有其他指标的质控品使用;其中,1#保养液是:在50~100毫升磷酸盐缓冲溶液中加入2.1~2.9g枸橼酸钠、0.2~0.5g枸橼酸、1.0~4.3g多聚葡萄糖、0.02~0.3g腺嘌呤配制成的溶液;2#保养液是:含有0.01~1.0%戊二醛的1#保养液溶液;固定液是0.01~12.6%的醛类化合物水溶液。
2.根据权利要求1所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于步骤B用2#保养液置于离心机中分离纯化是置于离心机中洗涤2~4次。
3.根据权利要求1或2所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于步骤C所述的固定,固定温度在10~25℃之间,其中10~20℃时固定时间在2小时以上,而21~25℃时固定时间在2小时之内。
4.根据权利要求1或2所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于固定液是0.01~12.6%的醛类化合物水溶液中所述醛类包含:甲醛、多聚甲醛、乙二醛、戊二醛、苯甲醛。
5.根据权利要求3所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于固定液是0.01~12.6%的醛类化合物水溶液中所述醛类包含:甲醛、多聚甲醛、乙二醛、戊二醛、苯甲醛。
6.根据权利要求1或2所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于最佳固定液是:以1~10毫升的30%~50%的戊二醛置于10%~30%的枸橼酸的金属盐溶液中,配制成0.9%~1.2%的戊二醛枸橼酸金酸盐溶液。
7.根据权利要求3所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于最佳固定液是:以1~10毫升的30%~50%的戊二醛置于10%~30%的枸橼酸的金属盐溶液中,配制成0.9%~1.2%的戊二醛枸橼酸金酸盐溶液。
8.根据权利要求4所述的一种白细胞的洗脱及固定方法,其特征在于最佳固定液是:以1~10毫升的30%~50%的戊二醛置于10%~30%的枸橼酸的金属盐溶液中,配制成0.9%~1.2%的戊二醛枸橼酸金酸盐溶液。
9.一种如根据权利要求1所述的一种白细胞的洗脱及固定方法所使用的专用过滤器,其特征在于该过滤器为漏斗式的细胞双层滤器,其过滤层为玻璃纤维滤膜。
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