[发明专利]一种点篮子鱼染色体的制备方法无效
申请号: | 201210247571.6 | 申请日: | 2012-07-17 |
公开(公告)号: | CN102766692A | 公开(公告)日: | 2012-11-07 |
发明(设计)人: | 宋炜;马凌波;张凤英;章龙珍;张涛;蒋科技 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
地址: | 200090 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 篮子 染色体 制备 方法 | ||
1.一种点篮子鱼染色体的制备方法,包括:
(1)从点篮子鱼中取出头肾组织置于盛有生理盐水的培养皿中,清洗除去血块及其他组织,剪碎头肾组织;然后将头肾组织充分匀浆制成细胞悬液;
(2)在上述细胞悬液中加入KCl溶液,于37~38℃低渗30~40min,离心;收集低渗后的细胞,加入预冷至4~5℃的卡诺氏固定液,吹打均匀后4~5℃下静置,离心后再固定一次;离心后,弃去上清液,加入预冷至4~5℃的固定液,吹打均匀后4~5℃下静置;
(3)离心后,弃去上清液,重新加入1~2ml预冷至4~5℃的固定液,吹打均匀后用预冷冻的玻片滴片,每片1-2滴,烘干;
(4)待上述玻片干燥后,用吉姆萨染液染色20-30min,将染色后的玻片依次用磷酸缓冲液和蒸馏水冲洗,烘干;待玻片干燥后,置于显微镜下观察,选取染色体分散良好的中期细胞进行显微摄影。
2.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中的生理盐水的质量百分比浓度为0.9%。
3.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的KCl溶液的浓度为0.075mol/L。
4.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的卡诺氏固定液由体积比为3:1的甲醇和冰醋酸配制。
5.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)和(3)中的固定液由体积比为1:1的甲醇和冰醋酸配制。
6.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中的吉姆萨染液的浓度为10wt%,pH值为6.8,由磷酸缓冲液配制。
7.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中的磷酸缓冲液的pH值为6.8。
8.根据权利要求1所述的一种点篮子鱼染色体的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)和(4)中的烘干为自然干燥或放入40℃烘箱中烘干。
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