[发明专利]一种荷仙菇多糖的提取方法

说明书

技术领域      

    本发明涉及以荷仙菇为原料的一种三因素（超声波、复合酶及碱法）复合提取多糖的方法。

背景技术

荷仙菇（Sparassia crispa (Wulf.) Fr.）又名绣球菌、绣球蘑，日本人称其花瓣菇。荷仙菇形似绣球而得名，其香味怡人、肉质脆嫩、口感佳美、风味独特，食味鲜美可口，同时具有抗癌、免疫调节、提高造血功能等功效，是一种珍贵的药食兼用的大型真菌，在日本被誉为梦幻神奇的菇。

荷仙菇多糖体中抗肿瘤主要活性成分6-分支，1,3-β-D葡聚糖（SCG）为菇类之最，含量可达50%，其SCG的含量约是灵芝的三倍、巴西蘑菇的四倍。研究显示，荷仙菇的抗肿瘤作用主要通过其活性成分SCG来实现的，而SCG由主要通过刺激细胞因子的产生来对抗肿瘤。在小白鼠的抗癌试验中，可100%阻止癌的发展，并可显著提高白血球数量，激活免疫系统。

荷仙菇主要活性成分——多糖体，不仅存在于细胞内，大量作为细胞壁支撑骨架掩埋于细胞壁中，释放难度较大。目前食用菌多糖产品的提取方法主要采用单因素（水提法、酸法、碱法等）提取法，诸多方法纯在多糖产率较低，原料浪费较大的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以荷仙菇为原料的三因素（超声波、复合酶及碱法）复合提取多糖的方法，该方法有效地提高了多糖的提取率，增加了荷仙菇的附加值。

本发明是一种荷仙菇多糖的提取方法，挑选新鲜无霉变荷仙菇子实体为材料，经清洗、烘干粉碎、超声波破壁、复合酶解、碱提最终得到多糖。其步骤为：

1)              清洗烘干粉碎：挑选新鲜、未老化、无霉变荷仙菇子实体，用清水洗净；将荷仙菇子实体切成0.2-0.4cm厚的薄片50-55℃烘干至恒重；研磨成粉过50—100目筛；

2)              超声波破壁：称取一定量荷仙菇粉末，加蒸馏水，料液比1:10—70，在功率100W—700W的超声条件下处理15—60min；

3)              复合酶酶解：超声处理后的溶液调pH为5.0—8.0，温度保持25—50℃，加入复合酶溶液（0.5%-3.0%的果胶酶、0.5%-3.0%的纤维素酶、0.5%-3.0%的蛋白酶）作用1—4h；

4)              碱提：上一步的酶解全液加入氢氧化钠，使氢氧化钠终浓度达到1mol/L，在50—70℃条件下浸泡1—3小时，此时溶液粘稠状，离心（4000—8000rpm）得上清液Ⅰ，残渣再用2—5倍体积的1mol/L氢氧化钠溶液再提一次或者多次，离心（4000—8000rpm）得上清液Ⅱ；合并上清液Ⅰ和Ⅱ，加醋酸调pH至5.5—7,真空浓缩至1/5,加3—5倍体积无水乙醇沉淀多糖，于4℃冰箱中静置过夜，离心（4000—8000rpm），得沉淀物，加适量蒸馏水溶解，装于透析袋中，流水透析1—3d，加3—6倍的无水乙醇醇沉，于4℃冰箱中静置过夜，离心（4000—8000rpm），得多糖沉淀，经真空冷冻干燥，得粗多糖。

附表1是本发明提取方法与常规方法的数据对比：

附表1         

三因素法提取与目前常用方法对比