[发明专利]抗高血压活性肽IVP

说明书

技术领域

本发明涉及两个抗高血压活性肽，具体涉及一种通过构建定量构效关系（Quantitative Structure-Activity Relationships，QSAR）数学模型和体外和体内生物活性实验筛选出两个抗高血压的合成三肽。

背景技术

我国高血压患病率的态势越来越严峻，当前常见的治疗高血压的药物有以下六种：利尿剂（可能引起低血钾症，影响糖代谢，使糖耐量下降）、β－阻滞剂（可带来中枢神经系统、消化系统以及血管系统的不良反应）、α－阻滞剂、钙拮抗剂（会导致水肿、头痛、潮红、多尿、低血压以及心脏传导受阻）、血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素II受体阻滞剂（可引起干咳、血钾高、甚至血管性水肿）。由于大部分药物都有副作用，所以科学家们一直致力于开发含有抑制血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme，ACE,EC 3.4.15.1）活性的小肽的功能食品，使高血压患者得益。ACE酶是一种外肽酶，是调节血压的重要因子，主要存在于血管的内皮细胞，在肺毛中含量最为丰富。根据文献：赵海珍,陆兆新,刘战民等.天然食品来源的血管紧张素转换酶抑制肽的研究进展[J].中国生化药物杂志,2004,25(5):315-317及文献：陈强.血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素II受体拮抗剂联合应用治疗肾小球疾病[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2001,10(3):274-277的报道，ACE酶的主要作用有两个，一个是使得血管紧张素I(Ang I)转化为血管紧张素II(Ang II)，另外一个是使缓激肽失活，以这两个作用影响肾素－血管紧张素系统（RAS）来完成血压的调节。血管紧张素II可以与血管组织中的特异性受体AT₁相结合，通过血流动力学作用，使得血管收缩，收缩肾小球出球小动脉，使肾血流量下降，肾小球毛细血管内压升高，缓激肽可以通过血流动力学作用，使血管舒张，舒张肾小球出球小动脉，使肾血流量上升，肾小球毛细血管内压降低。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供两种高效低毒的抗高血压活性肽。

为实现上述目的，本发明使用以下技术方案：

两种抗高血压活性肽，其氨基酸序列分别为：缬氨酸(Val)-异亮氨酸(Ile)-脯氨酸(Pro)（简称VIP）和异亮氨酸(Ile)-缬氨酸(Val)-脯氨酸(Pro)（简称IVP）。本发明选择了氨基酸的疏水性和氨基酸的空间占位（以分子量为衡量基准）建立了ACE酶抑制效果(LogIC50)与乳源性抑制肽(3aa)的数学模型Y=0.560-0.540*X₁₁-0.007*X₂₁-0.054*X₁₂+0.010*X₂₂+0.696*X₁₃+0.006*X₂₃。分析抗高血压活性肽的结构特征，如C-末端的氨基酸残基的疏水性和其倒数第二个氨基酸的拓扑空间结构，以及结合已知的ACE抑制二肽样本集，确定乳源抗高血压小肽的筛选原则：C-末端具有疏水性，以Pro、Phe、Trp和Tyr为主；C-末端倒数第二个氨基酸具有较小的拓扑空间。选择待测三肽序列，并通过构建的QSAR数学模型，对其理论LogIC₅₀值进行分析，根据其值的大小确定体内外活性检测候选小肽序列并进行合成，其中，X_ij代表的是结构性质，其中，j＝1,2,3，代表的是乳源三肽中氨基酸的位置，i=1,2，分别代表的是氨基酸的疏水性和分子量，疏水性均取了正值来带入方程进行运算。所选取的ACE酶抑制活性肽均取自牛奶中主要的蛋白质，所选取出的这些小肽的LogIC₅₀均为正值，即意味着具有ACE酶抑制活性，根据数学方程可知，C末端第一位氨基酸的疏水性具有重要的影响作用，因为，在所筛选出来的小肽中，首位为Ile和Val的小肽的抑制效果较好，即LogIC₅₀的值较小。从中筛选出了6个计算值比较理想的三肽分子异亮氨酸(Ile)-缬氨酸(Val)-脯氨酸(Pro)(简称IVP)，LogIC₅₀=0.2；异亮氨酸(Ile)-天冬酰胺(Asn)-脯氨酸(Pro)(简称INP)，LogIC₅₀=0.3878；异亮氨酸(Ile)-谷氨酰胺(Gln)-脯氨酸(Pro)(简称IQP)，LogIC₅₀=0.5278；缬氨酸(Val)-异亮氨酸(Ile)-脯氨酸(Pro)(简称VIP)，LogIC₅₀=0.5855；缬氨酸(Val)-亮氨酸(Leu)-脯氨酸(Pro)(简称VLP)，LogIC₅₀=0.6233；赖氨酸(Lys)-赖氨酸(Lys)-酪氨酸(Tyr)(简称KKY)，LogIC₅₀=0.674）。再通过体外和体内生物活性验证筛选出2个抗高血压能力最强的合成三肽IVP和VIP。