[发明专利]一种用固定化磷脂酶C脱胶的方法

权利要求书

1.一种用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法通过以下步骤实现：一、磷脂酶C的固定化：首先称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解；同时称取一定量的壳聚糖于5%的醋酸溶液中，40℃水浴保温溶解；再向溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl₂溶液，混匀；称取一定量的磷脂酶C，加入到10 mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl₂混合溶液中，以180 r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10 h；二、固定化酶脱胶：取水化大豆毛油300 g，预热至75℃，加入45%柠檬酸0. 6 mL混合搅拌维持30 min；冷却至温度为30~40℃左右，加入4mol/L NaOH溶液和一定量的蒸馏水混合均匀，然后取一定量的固定化磷脂酶加入大豆毛油中，60 r/min机械搅拌，在温度50℃下水浴反应一段时间；得到脱胶后的大豆毛油磷含量为3.8mg/kg，磷脂酶C脱胶后的油脂得率增长1.2倍；并确定了固定化磷脂酶C连续用于对大豆毛油的脱胶，使用6个批次后，测定固定化酶相对活力，结果酶活力仍保持在80％左右。

2.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤四中将油相中起始pH值为 5.5～8.0的条件下进行固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶。

3.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中油相中起始pH值为 5.5～8.0，反应时间30～90min的条件下，进行固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶。

4.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中油相中起始pH值为 5.5～8.0，反应时间30～90min，反应温度为35～65℃的条件下，进行固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶。

5.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中油相中起始pH值为 5.5～8.0，反应时间30～90min，反应温度为35～65℃，固定化酶添加量0.01%～0.09%的条件下，进行固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶。

6.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中固定化酶脱胶条件进行进一步确定，结果为油相中起始pH值为 6.0～8.0，反应时间40～80min，反应温度为40～60℃，固定化酶添加量0.02%～0.06%，用优化结果进行固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶。

7.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中将固定化酶脱胶后的油脂得率与常规酶法脱胶后油脂得率进行比较，得到固定化磷脂酶C脱胶后的油脂得率增长1.2倍。

8.根据权利要求1所述的用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中将固定化磷脂酶C连续用于对大豆毛油的脱胶，使用6个批次后，测定固定化酶相对活力，结果酶活力仍保持在80％左右。