[发明专利]检测药物对人肝细胞色素P450抑制作用的方法

权利要求书

1.一种检测药物对人肝细胞色素P450抑制作用的方法，其特征在于，步骤包括：

步骤1，选择人细胞色素P450的探针药物，将测试药物、探针药物与含所述人细胞色素P450的微粒体共同孵育；

步骤2，孵育结束后，检测探针药物在其特异性亚酶作用下转化生成代谢产物的量，代谢产物生成量越大，则测试药物对所述人细胞色素P450抑制作用越小。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含人细胞色素P450的微粒体为人肝微粒体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人细胞色素P450亚型选自CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4中的任意一种或其任意组合。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述亚型CYP1A2的探针药物为非那西丁、CYP2C9的探针药物为双氯芬酸、CYP2C19的探针药物为s-(+)美芬妥英、CYP2D6的探针药物为右美沙芬、CYP3A4的探针药物为咪达唑仑和睾酮中的任意一种或其混合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述非那西丁的代谢产物包括对乙酰氨基酚、所述双氯酚酸的代谢产物包括4-羟基双氯芬酸、所述s-(+)美芬妥英的代谢产物包括4-羟基美芬妥英、所述右美沙芬的代谢产物包括去甲右美沙芬、所述咪达唑仑的代谢产物包括1′-羟基咪达唑仑、所述和睾酮的代谢产物包括6β-羟基睾酮。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述孵育时间为1~60min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，微粒体蛋白浓度为0.01~1mg/ml。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述探针药物浓度为0.5~100μmol/L。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以未加测试药物组酶的活性为100%，然后检测加入测试药物后探针药物产生代谢产物的量，与未加测试药物组进行对比。

10.根据权利要求1或9所述的方法，其特征在于，还包括步骤3，将加入浓度梯度组测试药物测得的探针药物代谢产物生成速率与测试药物浓度之间按照非线性回归作图，和/或计算半数抑制浓度IC₅₀。