[发明专利]用于检测BMPR2基因突变的引物组、该引物组的用途及包含该引物组的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及引物，具体涉及用于检测BMPR2基因突变的引物组，本发明还涉及该引物组的用途，以及包含该引物组的试剂盒。

背景技术

肺动脉高压是各种原因引起的静息状态下右心导管测得的肺动脉平均压（mean pulmonary arterial pressure，mPAP）≥25mmHg的一组临床病理生理综合征。肺动脉高压可以作为一种疾病而独立存在，更常见的是很多疾病进展到一定阶段的病理生理表现。由于肺血管重塑引起肺循环血流动力学改变，最终可导致右心衰竭，甚至死亡。这是一种极度恶性的疾病，七成多患者是年轻人，几乎每个人都知道癌症愈后差，但没有人知道肺动脉高压是一种极度恶性疾病，它的病因复杂、发病率高、误诊率高、危害性强，其愈后是灾难性的，可以说，这种病就是心血管疾病中的癌症。这种疾病平均发病年龄是36岁，75%患者集中于20-40岁年龄段，还有15%患者年龄在20岁以下，几岁的孩子也会发病。世界上该病的发病率在1×10^-5～1×10^-6之间，其中约6%为家族性的。多数家族性肺动脉高压和超过26%的散发病例都伴有骨形成蛋白Ⅱ型受体基因（Bone morphogenetic protein receptorⅡgene，BMPR2）序列改变。BMPR2存在大量不同的突变，但其临床表现和病理学特征与散发例完全一致。因此采用DNA检测寻找BMPR2基因突变有助于识别家系中高风险的成员，以及未出生孩子的患病风险，这对提高人口素质，优生优育有重要的意义。对于散发性病人进行BMPR2基因突变检测，对指导用药，基因评估具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种用于检测BMPR2基因突变的引物组。

BMPR2基因第1到第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子中的任一区域在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变，都视为BMPR2基因发生了突变。因而，根据BMPR2基因第1至第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子分别设计出能专一性鉴别BMPR2基因是否突变的特异性引物组，可通过PCR扩增和测序测定BMPR2基因上述区域是否发生改变，以鉴定BMPR2基因是否发生突变，因此，本发明的用于检测BMPR2基因突变的引物组可以是BMPR2基因第1至第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子中任一区域对应的引物组。

本发明第一个目的提供的用于检测BMPR2基因突变的引物组，包括BMPR2基因第1到第13外显子区，3’UTR、5’UTR和启动子中任一区域对应的PCR扩增引物组，即选自BMPR2基因第1到第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子分别对应的PCR扩增引物组，具体地，所述引物组选自BMPR2基因的第1外显子区(Exon1)的PCR扩增引物组、第2外显子区(Exon2)的PCR扩增引物组、第3外显子区(Exon3)的PCR扩增引物组、第4外显子区(Exon4)的PCR扩增引物组、第5外显子区(Exon5)的PCR扩增引物组、第6外显子区(Exon6)的PCR扩增引物组、第7外显子区(Exon7)的PCR扩增引物组、第8外显子区(Exon8)的PCR扩增引物组、第9外显子区(Exon9)的PCR扩增引物组、第10外显子区(Exon10)的PCR扩增引物组、第11外显子区(Exon11)的PCR扩增引物组、第12外显子区(Exon12)的PCR扩增引物组、第13外显子区(Exon13)的PCR扩增引物组、3’UTR的PCR扩增引物组、5’UTR的PCR扩增引物组和启动子的PCR扩增引物组中的任意一组，所述的上述各PCR扩增引物组为表1所示。

表1：BMPR2基因PCR扩增引物序列

本发明所述的引物组还包括BMPR2基因第1到第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子中任一区域对应的PCR测序引物组，具体地，所述引物组包括选自BMPR2基因第1到第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子分别对应的PCR测序引物组中的任意一组。

本发明所述的PCR测序引物组如表2所示。

表2：BMPR2基因PCR测序引物序列

本发明的第二个目的是提供使用上述PCR扩增引物组在制备通过PCR扩增自生物样品获得核酸样品检测BMPR2基因是否突变的试剂中的用途。