[发明专利]一种利用LRK1基因转化提高水稻籼粳杂种育性的方法有效
申请号: | 201210255823.X | 申请日: | 2012-07-21 |
公开(公告)号: | CN103571869A | 公开(公告)日: | 2014-02-12 |
发明(设计)人: | 罗小金;杨金水;孙凡 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;C07K14/415;A01H5/00;A01H4/00 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 lrk1 基因 转化 提高 水稻 杂种 方法 | ||
1.一种利用LRK1基因转化提高水稻籼粳杂种育性的方法,其特征在于,利用基因枪微弹轰击法,将水稻LRK1基因转化水稻愈伤组织,经过恢复培养获得表达LRK1基因的水稻植株;其包括步骤:
(1)将LRK1基因编码序列插入植物表达载体构建重组表达载体;
(2)诱导处理水稻愈伤组织;
(3)用步骤(1)所得的重组表达载体转化水稻愈伤组织;
(4)恢复培养步骤(3)所得的水稻愈伤组织。
2.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的LRK1基因的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。
3.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的所述水稻LRK1基因还包括具有与水稻LRK1蛋白相同功能的、SEQ ID NO.2序列的变异形式;所述变异形式包括1-50个氨基酸的缺失、插入和/或取代,以及在C末端和/或N末端添加一个或20个以内的氨基酸;以及水稻LRK1蛋白的活性片段和活性衍生物。
4.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的LRK1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。
5.按权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的LRK1基因的核苷酸序列还包括编码具有水稻LRK1蛋白活性的多肽的核苷酸序列,如SEQ ID NO.1中32-3181位核苷酸序列及其简并序列。
6.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中采用基因枪微弹轰击法进行重组表达载体转化水稻愈伤组织。
7.按权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中恢复培养水稻愈伤组织的步骤包括:先在不含筛选剂的诱导培养基上生长,然后再在含有筛选剂的培养基上筛选,并将筛选后的愈伤组织光照培养。
8.按权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的筛选剂为潮霉素。
9.按权利要求7所述的方法,其特征在于,在含有筛选剂的培养基上筛选时,所述筛选剂浓度逐步提高并配合光照条件,将存活的水稻愈伤组织于分化培养基光照培养,分化出小植株后,转入生根壮苗培养基,直至移入温室。
10.转水稻LRK1基因在提高水稻籼粳杂种育性中的应用,其中,所述的LRK1基因的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。
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