[发明专利]一种硝化细菌生物氧化石墨及其制备方法

权利要求书

1.一种硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于所述氧化石墨由以下步骤制备：

第一步，将石墨分散到水中，超声分散，形成均匀的石墨分散液；

第二步，将第一步所得石墨分散液加入到硝化细菌培养基中，灭菌，冷却，接种，于恒温振荡培养箱中培养数天，进行生物氧化；

第三步，将第二步所得硝化细菌生物氧化石墨静置、离心，采用稀盐酸、乙醇、水多次反复清洗、离心沉淀，溶解去除氧化过程中生成的菌体、代谢产物及其它离子，获得初次生物氧化石墨；

第四步，将第三步得到的硝化细菌生物氧化石墨沉淀于水中超声，静置或离心，分别对上清液及沉淀进行真空干燥，制备得到不同氧化程度的纯净硝化细菌生物氧化石墨。

2.根据权利要求1所述的硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于第一步中所述的石墨质量浓度为0.1%-8%，超声时间为10-360 min。

3.根据权利要求1所述的硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于第二步中所述的石墨浓度为0.02-0.8mg/mL；硝化细菌培养基成分包括 (NH₄)SO₄ 0.24g/L，琥珀酸钠 2.81g/L，维氏盐溶液50mL/L，pH7.0，高压蒸汽湿热灭菌15-30min，灭菌温度为118-123℃；接种量为2%-20%、培养温度25-35℃、转速为50-220r/min、培养时间为1天-10天。

4.根据权利要求3所述的硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于所述的维氏盐溶液成分和含量为：K₂HPO₄·3H₂O 6.5g/L，MgSO₄·7H₂O 2.5g/L，NaCl 2.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.05g/L，MnSO₄·H₂O 0.04g/L。

5.根据权利要求1所述的硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于第三步中所述的离心转速为5000-13000r/min，离心时间为15-60min；稀盐酸浓度为0.1-6mol/L，乙醇质量浓度为5%-100%。

6.根据权利要求1所述的硝化细菌生物氧化石墨，其特征在于第四步中所述的超声处理时间为20-120min，离心转速为500-8000r/min，离心时间为5-30min；真空干燥采用普通真空干燥或真空冷冻干燥，普通真空干燥温度为室温-100℃；真空冷冻干燥温度为-20-（-80）℃，真空度≦150Pa，干燥时间0.5-24h。

7.一种硝化细菌生物氧化石墨的制备方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

第一步，将石墨分散到水中，超声分散，形成均匀的石墨分散液；

第二步，将第一步所得石墨分散液加入到硝化细菌培养基中，灭菌，冷却，接种，于恒温振荡培养箱中培养数天，进行生物氧化；

第三步，将第二步所得硝化细菌生物氧化石墨静置、离心，采用稀盐酸、乙醇、水多次反复清洗、离心沉淀，溶解去除氧化过程中生成的菌体、代谢产物及其它离子，获得初次生物氧化石墨；

第四步，将第三步得到的硝化细菌生物氧化石墨沉淀于水中超声，静置或离心，分别对上清液及沉淀进行真空干燥，制备得到不同氧化程度的纯净硝化细菌生物氧化石墨。

8.根据权利要求7所述的硝化细菌生物氧化石墨的制备方法，其特征在于第一步中所述的石墨质量浓度为0.1%-8%，超声时间为10-360 min；第二步中所述的石墨浓度为0.02-0.8mg/mL；硝化细菌培养基成分包括 (NH₄)SO₄ 0.24g/L，琥珀酸钠 2.81g/L，维氏盐溶液50mL/L，pH7.0，高压蒸汽湿热灭菌15-30min，灭菌温度为118-123℃；接种量为2%-20%、培养温度25-35℃、转速为50-220r/min、培养时间为1天-10天。