[发明专利]融合蛋白、药物组合物及预防或治疗癌症的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2011年7月25日在韩国知识产权局提交的韩国专利申请No.10-2011-0073635的权益，其公开内容通过引用全部引入本文中。

电子提交材料的通过引用的引入

在本文中通过引用全部引入的是与此同时提交且鉴别如下的计算机可读的核苷酸/氨基酸序列表：2011年8月9日创建的名为“708782SequenceListing.TXT”的一份63,762字节的ASCII(文本)文件。

背景技术

目前，用于治疗的抗体的开发正在积极进行。这为用现有的合成药物难以治疗的疾病提供了解决方案，并且正在取代合成药物。目前，16种用于治疗的抗体是可商购的，且约7000或更多种抗体在被全球约300家或更多的公司开发。这些抗体产品正使医药市场持续增长。

血管发生对于所有癌组织中的细胞分化是必不可少的，且即使抑制血管发生的靶是已知的，由于其效率低，还没有单独的治疗剂是可用的。此外，尚未开发出可广泛用于各种癌症的治疗剂。

二十年前，被称为脂皮质蛋白、依钙蛋白、内附蛋白等的蛋白质被赋予标准名膜联蛋白(Annexin)，其已在过去的十年中使用。

膜联蛋白结合钙和磷脂，并具有独特的保守域，其中称为内附蛋白折叠的包括“GXGTDE”(SEQ ID NO：118)基序的约70个氨基酸序列重复4次(有时重复8次)。常规已知的膜联蛋白包括保守域。蛋白质取决于序列保守与否而被鉴定为膜联蛋白。已知膜联蛋白存在于从哺乳动物到霉菌的多种活生物体中，且已报道膜联蛋白I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、XIII等存在于人类中。已知膜联蛋白涉及骨的结构形成和多种生物现象例如膜运输、跨膜通道活性、磷脂酶A2的抑制、凝血抑制、有丝分裂信号的转导和细胞-基质相互作用的介导。

虽然相关技术公开了通过使用结合膜联蛋白A1的抗体递送物质的方法，但是没有关于通过使用抗体治疗癌症的公开内容。虽然另一相关技术公开了通过将针对癌症的多重标记的抑制剂组合治疗癌症的方法，但是没有公开使用膜联蛋白A1作为标记。

发明内容

本发明提供包含(a)包括特异性结合膜联蛋白A1的多肽的第一蛋白质和(b)包括诱导细胞毒性淋巴细胞的细胞毒性活性的多肽的第二蛋白质的融合蛋白，以及包含所述融合蛋白和可药用载体的药物组合物和使用所述创造性的药物组合物治疗或预防癌症的方法。

额外的方面将在随后的说明中部分阐述，和部分将从该说明中明晰，或者可通过所呈现的实施方式的实践而获知。

附图说明

图1是说明融合蛋白的示意图，所述融合蛋白包含：包括特异性结合膜联蛋白A1的多肽的第一蛋白质和包括诱导作用于癌细胞的细胞毒性淋巴细胞的细胞毒性活性的多肽的第二蛋白质。

图2是NdeI-XhoI片段的示意图，所述NdeI-XhoI片段插入到用于根据实施方式的由以下构成的融合蛋白表达的载体中：包括特异性结合膜联蛋白A1的多肽的第一蛋白质和包括诱导细胞毒性淋巴细胞的细胞毒性活性的多肽的第二蛋白质。(GGGGS)接头对应于SEQ ID NO：120。

图3是说明融合蛋白的纯化结果的照片，所述融合蛋白包含：包括特异性结合膜联蛋白A1的多肽的第一蛋白质和包括抗CD3的第二蛋白质。根据实施方式，在各道中的L、FT、W和数字分别表示加载、流过、洗涤和咪唑摩尔浓度(mM)。

图4是AA1BPxCD3-活化的T细胞对分离的膜联蛋白A1-阳性/-阴性细胞的效果的图。细胞毒性T细胞克隆(由PMBC产生)与靶细胞(Ramos、SNU-1、SNU-2)混合并以10:1的效应物对靶(E:T)之比在AA1BPxCD3的指示浓度下温育3小时。显示来自特异性靶溶解的重复三次测定的平均值，以百分比计。

具体实施方式

现在将详细介绍实施方式，其实例在附图中说明，其中相同的附图标记始终是指相同的要素。在这方面，本发明的实施方式可具有不同的形式，且不应解释为限于本文所阐述的说明。因此，以下仅通过参考附图描述实施方式以解释本说明的各方面。