[发明专利]酵母多糖的分离纯化方法

权利要求书

1.一种酵母多糖的分离纯化方法，其特征在于，包括下列步骤：

1）、酵母细胞壁破壁；2）、葡聚糖和甘露聚糖粗步分离；3）、酵母甘露聚糖的进一步纯化；和4）、酵母葡聚糖的进一步纯化。

2.如权利要求1所述的酵母多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述酵母细胞壁破壁为：以啤酒厂废酵母为原料，采用超声波破碎法，选择超声频率50 kHz、超声3次、每次10分钟；接着在-20℃下冷冻2 h，再置于100℃水中骤然升温使其融化，作用15分钟，冷却至室温后再放入-20℃下冷冻2 h，如此反复3次。

3.如权利要求2所述的酵母多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述葡聚糖和甘露聚糖粗步分离为：采用重量浓度为1%的KOH溶液将处理后的破壁酵母细胞壁在4℃下搅拌萃取20 h，离心取上清液，沉淀物用KOH溶液重复萃取2次，碱提取物用玻璃纤维滤纸过滤，加入饱和硫酸铵于4℃条件下过夜，离心后将上清液冷冻干燥即得甘露聚糖粗品，含有部分蛋白质；剩下的沉淀物为酵母葡聚糖粗品。

4.如权利要求3所述的酵母多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述酵母甘露聚糖的进一步纯化为：采用蛋白酶E和F对甘露聚糖粗品在50℃、 pH值为8.0的条件下处理6小时，处理后的溶液中加入重量浓度为50%的乙醇，离心后取沉淀，加水复溶后使用重量浓度为 70%的乙醇进行二次醇沉，离心获得的沉淀即为酵母甘露聚糖产品。

5.如权利要求4所述的酵母多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述酵母葡聚糖的进一步纯化为：采用蛋白酶C和D对酵母葡聚糖粗品在50℃、pH值为7.6的条件下处理4小时，处理后的溶液中加入重量浓度为50%的乙醇，离心后取沉淀，加水复溶后使用重量浓度为 70%的乙醇进行二次醇沉，离心获得的沉淀即为酵母甘露聚糖产品。