[发明专利]一种超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒及其制备方法。

背景技术

现有技术中的琼脂糖凝胶电泳板的配置方法，其厚度往往超过3mm，不仅影响蛋白质迁移率，还影响染色效果，因为太厚染料不易渗透进去，蛋白质条带往往形成空泡，对扫描定量结果直接造成影响；另外，脱色时间也很长。此外，超薄型琼脂糖电泳胶板(厚度＜1mm)，如通过齿状加样模具在胶板上留下凹槽来加样会导致电泳胶板破损，无法使用。从而导致采用琼脂糖凝胶电泳板不适用于分离血清蛋白类的诊断试剂盒，而使得现有产品中价格均较高。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是提供一种超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒及其制备方法。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒，其包括：一超薄琼脂糖凝胶电泳胶板，其厚度＜1mm；一带有等距微孔的加样薄膜；染色剂。

作为一种优选方案，所述超薄琼脂糖凝胶电泳胶板宽度与加样薄膜宽度比为1∶1.1～1.5。

作为进一步优选方案，所述微孔的数量为5～10个。

作为进一步优选方案，所述微孔为长条形，长为2～7mm，宽0.3～0.8mm；最佳为长5mm，宽0.5mm。

作为进一步优选方案，所述染色剂为0.1％氨基黑10B。

制备上述超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒，包括以下步骤：

d)制备超薄琼脂糖凝胶电泳胶板，将1％的琼脂糖用沸水浴融化后且冷却至60℃左右，倒入长10cm、宽7cm，厚0.8mm的塑料模板中，用一直尺或三角尺的一边将凝胶拉平，待凝固后，将一裁成与胶板同样大小的保险薄膜贴于凝胶板上，放置塑料盒中；

e)制备加样薄膜，取一张教学用投影胶片，裁取长10cm，宽2cm的长条状，在其中间位置用手术刀片刻制8个线状排列的加样微孔，微孔长5mm，宽0.5mm，两孔间隔3.5mm；

f)放置染色剂，包装。

与现有技术相比，本发明采用自制的塑料薄板作为模具，所制备的琼脂糖板厚度为＜1mm，甚至可达0.8mm，电泳通电顺畅，染色时间缩短，且染色完全，脱色时间极短，蛋白质分离的分辨率很高，且与加样薄膜配套使用点样以代替传统的锯齿物理成孔后点样，操作更简便，且根据胶板宽度已预先配置相应的已刻制的长条状微孔，加样时，可将这膜紧贴于琼脂糖胶板上，将血清点在各孔上，吸收几分钟后取掉即可，点样效果极佳；通过试剂盒适用范围实验结果可知，本发明提供的超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类可精确的检测出：白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。鉴于血清蛋白电泳图谱是了解患者血清蛋白质全貌的有价值的方法，可用为初筛实验。如急性炎症或急性时相反应时常以α1、α2区带加深为特征；妊娠型α1区带增高，伴有β区带增高；肾病综合征、慢性肾小球肾炎时呈现白蛋白下降，α2、β球蛋白升高；缺铁性贫血时可由于转铁蛋白的升高而呈现β区带增高，而慢性肝病或肝硬变呈现白蛋白显著降低，γ球蛋白升高2～3倍，示免疫球蛋白多克隆高，甚至可见β-γ桥，还可在γ区呈现细而密的寡克隆区带；单克隆免疫球蛋白异常症(M蛋白血症)则在电泳区带α-γ区呈现致密而深染，高度集中的蛋白克隆增生区带(M蛋白区带)。因此，分析血清蛋白电泳分离图谱，有助于对疾病的正确诊断，其应用前景十分广阔。

附图说明

图1为本发明提供的制备超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板的模具示意图；

图2为本发明提供的制备超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板与加样薄膜配套使用时的示意图；

图3为本发明提供的超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒的结构示意图。

具体实施方式

下面结合实施例及对比例对本发明作进一步详细、完整地说明。

实施例

1.制备超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒

a)制备超薄琼脂糖凝胶电泳胶板，将1％的琼脂糖用沸水浴融化后且冷却至60℃左右，倒入长10cm、宽7cm，厚0.8mm的塑料模板(如图1所示)中，用一直尺或三角尺的一边将凝胶拉平，待凝固后，将一裁成与胶板同样大小的保险薄膜贴于凝胶板上，放置塑料盒中；

b)制备加样薄膜，取一张教学用投影胶片，裁取长10cm，宽2cm的长条状，在其中间位置用手术刀片刻制8个线状排列的加样微孔，微孔长5mm，宽0.5mm，两孔间隔3.5mm(如图2所示)；