[发明专利]一种肌钙蛋白检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地说涉及一种检测人肌钙蛋白的检测试剂盒。

背景技术

肌钙蛋白又称肌钙蛋白I（cTnI），是心肌钙蛋白复合物的亚单位，存在于心肌肌原纤维细肌丝上，是心肌细胞的重要结构蛋白。在心肌细胞膜完整时cTnI不能透过细胞膜进入血循环，当心肌细胞因缺血缺氧而发生变性坏死时，cTnI可通过破损的细胞膜弥散进入细胞间质，经淋巴回流入血。cTnI具有在血中出现时间早、敏感度高、特异性强和诊断窗口期长等特点，是诊断急性心肌梗死的理想指标。

目前已知的测定肌钙蛋白的方法有电化学发光免疫检测法（ECLIA）；酶联荧光分析法（ELFA）。这些方法具有操作繁琐、耗时长、过度浪费资源的缺点，不适于常规检验。

发明内容

本发明的目的是提供一种肌钙蛋白的检测试剂盒。该试剂盒可直接应用于全自动生化分析仪上，结果准确性强、试剂稳定性好、使用方便、便于大规模推广。

本发明的另一目的是提供上述检测试剂盒的生产制备及使用方法。

为实现上述目的，本发明提供的试剂盒组成为：

试剂R1：缓冲液、聚乙二醇、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白；

试剂R2：缓冲液、结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、吐温-20、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白。

本发明提供的上述试剂盒的制备方法及操做步骤如下：

（a）按下列比例配制好试剂：

试剂R1：

Tris缓冲液      200-220mmol/L

聚乙二醇        5-10 mmol/L

叠氮钠          1-5 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  1-5mmol/L

牛血清白蛋白    1-5mmol/L；

试剂R2：

Tris缓冲液      200-220mmol/L

结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子   3.5-5%（v/v）

吐温-20         1-5mmol/L

叠氮钠          0.5-3 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  1-5mmol/L

牛血清白蛋白    1-5mmol/L

（b）将试剂与待测样本按一定比例混合，使其完全反应；

（c）用半/全自动生化分析仪测定吸光度变化值；

（d）根据吸光度变化值计算出样本中肌钙蛋白的浓度。

具体实施方式

下述实施例是为了更详细的解释本发明，但不应理解为本发明局限于此。

实施例1：

本发明的试剂盒举例是双试剂，其中：

试剂R1：

Tris缓冲液      200mmol/L

聚乙二醇        8 mmol/L

叠氮钠          5 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L；

试剂R2：

Tris缓冲液      200mmol/L

结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子   5%（v/v）

吐温-20         5mmol/L

叠氮钠          3 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L。

实施例2：试剂盒使用方法。

1.试剂准备，试剂为液体双试剂，开瓶即用，其中：

试剂R1：

Tris缓冲液      200mmol/L

聚乙二醇        8 mmol/L

叠氮钠          5 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L；

试剂R2：

Tris缓冲液      200mmol/L

结合有肌钙蛋白单克隆抗体的乳胶粒子   5%（v/v）

吐温-20         5mmol/L

叠氮钠          3 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L。

2.全自动生化仪参数设置

(a)检测温度：37℃

(b)检测波长：主波长为500nm；副波长为700 nm；