[发明专利]晶态的D-异谷氨酰基-D-色氨酸以及D-异谷氨酰基-D-色氨酸的单铵盐

说明书

发明领域

本发明涉及一种新颖的稳定的D-异谷氨酰基-D-色氨酸的晶态形式，以及一种用于它的纯的形式（不含无机盐）的分离的方法。本发明还涉及一种新颖的稳定的D-异谷氨酰基-D-色氨酸的铵盐，以及一种通过重结晶和/或传统的硅胶柱层析法用于它的纯的形式的生产的方法。 

发明背景 

D-异谷氨酰基-D-色氨酸（也称为H-D-iGlu-Trp-OH或Thymodepressin）是一种的合成的血调节二肽（hemoregulatory dipeptide），它是为了治疗自身免疫疾病（包括银屑病）而研发的（Sapuntsova,S.G.,et al.(May 2002),Bulletin of Experimental Biology and Medicine,133(5),488-490）。在俄罗斯（US 5,736,519），Thymodepressin被认为是一种对银屑病有效的治疗，在那里该药物当时作为在液体配制品中的二钠盐而被出售，用于注射以及鼻内给药。它是一种免疫抑制剂并选择性地抑制骨髓细胞的增殖，并由此诱导免疫抑制。 

已知的D-异谷氨酰基-D-色氨酸二钠盐的固体形式是一种非晶态粉末，该粉末是吸湿的并且很难进行处理。Thymodepressin二钠盐的结构说明于Kashirin,D.M.,et al.(2000),Pharmaceutical Chemistry Journal,34(11),619-622中。通过化学文摘服务社（CAS）登记系统对D-异谷氨酰基-D-色氨酸的单钠盐进行鉴定，并将其列于CASREGISTRY^SM文件夹中，但不存在顾虑它的制备以及物理性质的公开文件。旨在用于药物用途的一种化合物（例如D-异谷氨酰基-D-色氨酸）的粉状或非晶态形式可引起生产的难题，这是因为堆密度问题、 吸湿性、以及通过真空干燥不能被校正的可变的含水量。D-异谷氨酰基-D-色氨酸是一种二肽，并且不推荐在真空条件下在升高的温度（例如80至100℃）中对非晶态形式进行干燥。 

在文献中被报道的仅有的H-D-iGlu-D-Trp-OH的合成被披露于US5,736,519中。根据在US5,736,519的实例1所报道的方法（它在此被描述为方案1），用1,3-二环已基碳二亚胺（DCC）与Boc-D-Glu-OH（1.1）进行反应，以给出该环酐（1.2）。当通过过滤，去除二环己基脲（DCU）时，用H-D-Trp-OH与酸酐（1.2）进行反应，以给出二肽Boc-D-iGlu-D-Trp-OH（1.3）以及Boc-D-Glu-D-Trp-OH（1.4）的混合物。组合的粗Boc-D-iGlu-D-Trp-OH（1.3）以及Boc-D-Glu-D-Trp-OH（1.4）的产率是70%。然而，该混合物仅包含不超过35%的所希望的中间物Boc-D-iGlu-D-Trp-OH（1.3）。在40℃下，通过搅拌以甲酸作为溶剂的（1.3）以及（1.4）的溶液达一小时，去除该Boc保护基团。（1.3）以及（1.4）与甲酸的比率是大约1g:8mL（重量/体积）。该产物是H-D-iGlu-D-Trp-OH（1.5）以及H-D-Glu-D-Trp-OH（1.6）的混合物。因为肽（1.5）以及（1.6）以相同的量存在，所以纯化要求使用吡啶醋酸缓冲液的离子交换层析。所希望的产物H-D-iGlu-D-Trp-OH（1.5）的产率是Boc-D-iGlu-D-Trp-OH（1.3）的35%。因此，来自Boc-D-Glu-OH的H-D-iGlu-D-Trp-OH（1.5）的总产率是12.25%。 

方案1：如US 5,736,519所述的H-D-iGlu-D-Trp-OH的合成 

在US 5,736,519中所述的方法具有以下几个不足： 

1.步骤1A中的DCC可能导致其他副产物，例如 

来自DCC偶合肽的副产物已报道于Marder,O.,and Albericio,F.(June 2003),Chemical Oggi(Chemistry Today),6-32中。