[发明专利]喹硫平在制备治疗胶质瘤的药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，涉及化合物的制药新用途。

背景技术

胶质瘤是临床上常见的恶性肿瘤之一，具有复发率高、病程进展快、死亡率高的特点，目前仍缺乏安全、有效的治疗手段。最近研究发现，胶质瘤复发率高可能与胶质瘤干细胞密切相关，胶质瘤干细胞存在于脑胶质瘤组织中，对放疗和化疗均不敏感，是胶质瘤复发的根源。因此，靶向胶质瘤干细胞的治疗药物的研发，可能提高胶质瘤的治愈率。

非典型精神病药物——喹硫平主要用于治疗精神分裂症，且副反应较少。迄今为止，尚未见喹硫平具有抗胶质瘤作用的相关报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于考察喹硫平是否具有抗胶质瘤和胶质瘤干细胞的作用，从而提供喹硫平在制药领域中的新用途。

为达到上述目的，本发明通过在体和离体实验，对喹硫平的抗胶质瘤和胶质瘤干细胞的作用进行了考察。在体实验结果显示，喹硫平能通过抑制胶质瘤细胞的增殖来抑制胶质瘤的生长，并促进胶质瘤细胞向少突胶质样细胞分化；离体实验结果显示，喹硫平能抑制胶质瘤干细胞的增殖，并促进其向少突胶质样细胞分化成熟。从而证实了喹硫平具有抗胶质瘤作用并能够以胶质瘤干细胞为作用靶点发挥抗胶质瘤作用，可用于制备治疗胶质瘤的药物，对胶质瘤的治疗及预后起到良好的效果。

本发明的有益效果在于：本发明公开了喹硫平在制备治疗胶质瘤的药物中的新用途，不仅拓宽了喹硫平的应用范围，提升了其市场价值，而且为胶质瘤的治疗提供了一种新的药物。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对喹硫平的抗胶质瘤作用作进一步描述，其中：

图1 显示了喹硫平抑制胶质瘤生长，其中A为喹硫平治疗组和对照组在21天时的胶质瘤大小对比（每组各3只动物，重复实验2次），B为喹硫平治疗组和对照组的胶质瘤生长曲线。

图2 显示了抑制胶质瘤细胞增殖，并促进其向少突胶质样细胞分化，其中A为免疫组织化学检测喹硫平治疗组和对照组胶质瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）和GFAP阳性细胞数，B为RT-PCR检测喹硫平治疗组和对照组胶质瘤中细胞增殖相关基因和少突胶质细胞相关基因的表达，C为Western blotting检测喹硫平治疗组和对照组胶质瘤中少突胶质相关蛋白和星形胶质细胞标志物GFAP的表达。

图3 显示了喹硫平抑制胶质瘤干细胞增殖，其中A为CCK-8比色法检测喹硫平对细胞活性的影响，B为流式细胞检测喹硫平对细胞周期的影响。

图4 显示了喹硫平促进胶质瘤干细胞向少突胶质样细胞分化，其中A为喹硫平处理组（左）和对照组（右）胶质瘤干细胞在分化培养4天后的显微视图，B为喹硫平处理组和对照组胶质瘤干细胞在分化培养4天后的少突胶质样细胞百分率，C为qRT-PCR检测喹硫平处理组和对照组胶质瘤干细胞在分化培养4天后的MBP和GFAP mRNA水平。

上述各图中，QUE表示喹硫平治疗组或喹硫平处理组，CTL表示对照组。

具体实施方式

下面将通过具体实验例对喹硫平的抗胶质瘤作用进行详细的描述。

一、实验材料及仪器

1．实验动物和生物材料

6-8周成年裸鼠（雄性）20只，体重18-22克，由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供。小鼠成胶质瘤细胞株GL261由中国人民解放军第三军医大学附属第一医院病理研究所提供。

2．实验试剂

喹硫平（阿斯利康公司），Trizol 试剂盒（Invitrogen公司），RIPA裂解液和PMSF（申能博彩生物科技有限公司），小鼠抗PCNA（Dako公司），兔抗GFAP（博士德公司），DMEM/ F12、胎牛血清、青霉素、链霉素和B27（Gibcol公司），多聚甲醛、重组人EGF（rhEGF）和Accutase溶液（Sigma公司），bFGF（Upstate公司），CCK-8试剂盒（碧云天生物技术有限公司），SYBR primescript RT-PCR试剂盒（TaKaRa公司）。

3．实验仪器

冰冻切片机（Leica公司）、共聚焦激光扫描显微镜（Olympus公司）、酶标仪（Bio-rad公司）、Rotor-Gene 6000 实时遗传分析仪（Corbett Life Science公司）。

二、实验方法和结果

（一）在体实验

1．喹硫平抑制胶质瘤生长