[发明专利]一种VEFG受体酶联诊断试剂盒及其制备方法无效
| 申请号： | 201210271348.5 | 申请日： | 2012-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN102854322A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 吴克 | 申请（专利权）人： | 吴克 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 何新平 |
| 地址： | 201206 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 vefg 受体 诊断 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
1.一种VEGF受体酶联检测试剂盒，其特征在于，所述VEGF受体酶联诊断试剂盒包括：酶联板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、酶联物、浓缩洗涤液、显色剂A＆B、终止液和封板胶纸；
其中：酶联板为血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体包被的酶联反应板；
酶联物为辣根过氧化物酶标记血管内皮生长因子单克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的VEGF受体酶联检测试剂盒，其特征在于：
所述阳性对照为血管内皮细胞生长因子蛋白冻干粉；
所述阴性对照为动物血清冻干粉；
所述样品稀释液为0.05%吐温-20～80，l%牛血清白蛋白，l0mM乙二胺四乙酸二钠，0.05%硫柳汞，0.4M NaCl，pH6.5；
所述浓缩洗涤液为137mM NaCl，2.7mM KC1，l0mM Na2HP04，2mMKH2P04，0.05%吐温20，Ph7.4：
所述显色剂A液为H2O2溶液，所述显色剂B液为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺溶液；
所述终止液为2MH2S04溶液。
3.根据权利要求1所述的VEGF受体酶联检测试剂盒，其特征在于：各物质的量以酶联板的孔数为标准。
4.根据权利要求1所述的VEGF受体酶联检测试剂盒，其特征在于：所述酶联板为96孔。
5.一种权利要求1所述的VEGF受体酶联检测试剂盒的制备和操作方法，其特征在于，主要步骤为：
(a)将血管内皮细胞生长因子受体包被于固体支持物酶联反应板上；
(b)用封闭液封闭；
(c)特生物标本加入到预包被的酶联反应板反应孔中，生物标本中的血管内皮细胞生长因子特异地与血管内皮细胞生长因子受体结合；
(d)用血管内皮细胞生长因子单克隆抗体检测血管内皮细胞生长因子；
(e)显色底物为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺溶液。
6.根据权利要求5所述的VEGF受体酶联检测试剂盒的制备和操作方法，其特征在于：步骤a所述的血管内皮细胞生长因子受体用昆虫细胞表达。
7.根据权利要求5所述的VEGF受体酶联检测试剂盒的制备和操作方法，其特征在于：步骤c所述的生物标本为癌症、血管病、糖尿病视网膜病及类风湿关节炎生物个体的血清、血浆、脑脊液、唾液、组织提取液或尿液。
8.根据权利要求5所述的VEGF受体酶联检测试剂盒的制备和操作方法，其特征在于：步骤d所述的血管内皮细胞生长因子单克隆抗体是用血管内皮细胞生长因子免疫小鼠所得。
9.根据权利要求5所述的VEGF受体酶联检测试剂盒的制备和操作方法，其特征在于：步骤d所述的单克隆抗体用辣根过氧化物酶标记。
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