[发明专利]一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒无效
申请号: | 201210271610.6 | 申请日: | 2012-08-02 |
公开(公告)号: | CN102925587A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 徐志文;赵勤;朱玲;李淞;周璐;周远成 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学;四川高金食品股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 625014 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 病毒 rt pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒,其特征在于,按照每个试剂盒检测20个样品计,每次检测样品时设阳性、阴性对照,试剂盒组成:
阳性对照模板:猪嵴病毒阳性样品抽提RNA,逆转录后获得的cDNA,共20ul,每次1ul;
阴性对照样品:SPF猪粪便样品和PBS按SPF猪粪便样品的重量:PBS的体积=0.5~1.0∶1加入PBS混匀,3000r/min离心15min,取上清液抽提RNA,逆转录后获得的cDNA,共20ul,每次用1ul;
上游引物P1和下游引物P2浓度均为10pmol/ul,各30ul,每个样品各用0.5ul;
上游引物P1:5’-CGTCTCATTGGAGATGAACG-3’;
下游引物P2:5’-TTTGTCGTAGAACTCCTTGA-3,;
2×Taq PCR Master Mix:300ul,每个样品用5ul;
ddH2O:200ul,每个样品用3ul;
矿物油:600ul,每个样品加10ul。
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