[发明专利]一种蝉棒束孢菌株的试管筛选方法及培养基

权利要求书

1.一种蝉棒束孢菌株的试管筛选法，步骤如下：

1）采集野生蝉花或其分生孢子，通过含抗生素的马铃薯-葡萄糖或含抗生素的马铃薯-蔗糖平板培养基对其进行分离纯化，获得蝉棒束孢单菌落；

2）从步骤1）的平板培养基上挑取蝉棒束孢单菌落至马铃薯-葡萄糖或马铃薯-蔗糖斜面培养基，培养获得分生孢子；

3）收集步骤2）获得的分生孢子，加灭菌水充分震荡混匀，配制孢子液；将小麦用水浸泡充分吸胀后沥干，将吸涨后的小麦装入试管中，并按照吸涨后的小麦：水=1：1～1.5的质量比向试管中加水，塞上棉塞，灭菌，制备得到试管培养基；

4）将步骤3）的孢子液接种到试管培养基内，培养并观察试管中子实体、孢子或菌丝产生情况。

2.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤1）所述含抗生素的马铃薯-葡萄糖平板培养基的配方为：

所述含抗生素的马铃薯-蔗糖平板培养基的配方为：

3.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤1）所述平板培养基的培养条件为23～26℃，黑暗培养4～6天。

4.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤2）所述马铃薯-葡萄糖斜面培养基的配方为：马铃薯15～25wt％，葡萄糖1.5～2.5wt％，琼脂1.5～2.5wt％，余量为水；所述马铃薯-蔗糖斜面培养基的配方为：马铃薯15～25wt％，蔗糖1.5～2.5wt％，琼脂1.5～2.5wt％，余量为水。 

5.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤2）所述斜面培养基的培养条件为23～25℃，黑暗培养10～15天。

6.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤3）所述孢子液的浓度为10⁶～10⁷个/ml。

7.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤3）中，每支试管装入1/7～1/3试管体积的吸涨后的小麦。

8.如权利要求1所述的筛选法，其特征在于，步骤4）孢子液接种到试管培养基的接种量为5～10v/w%；所述试管培养基的培养条件为20～25℃下，光照强度50～200Lux，培养20～25天。

9.一种小麦培养基在筛选蝉棒束孢菌株中的应用，其特征在于，所述小麦培养基的组成为充分吸涨并沥干的小麦以及水，并且充分吸涨并沥干的小麦和水的质量比为1：1～1.5。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述充分吸涨并沥干的小麦的制备方法为将小麦浸入水中浸泡8～12h，取出小麦并沥干。