[发明专利]生长因子复合物

说明书

本申请是申请日为2001年09月24日的申请号为01819321.8标题为“生长因子复合物”的申请的分案申请

发明领域

本发明涉及一种分离的蛋白质复合物，其包含生长因子结合蛋白和玻连蛋白。特别地，本发明涉及一种分离的蛋白质复合物，其包含一种胰岛素样生长因子、胰岛素样生长因子结合蛋白和玻连蛋白。本发明还提供了生长因子复合物，其包含促进或增强生长因子复合物形成的不同生长因子和/或生长因子结合蛋白。本发明还提供了调节细胞增殖和/或迁移的方法，以进行创伤修复，皮肤修复，化妆用皮肤护理和组织修复治疗。相反，通过破坏蛋白质复合物在体内形成，可抑制生长因子驱动的细胞增殖和/或迁移，以例如治疗癌症，牛皮癣，动脉硬化和有疤痕过度生长倾向的创伤。这些治疗也许具有医学和兽医学应用价值。

发明背景

皮肤的生长，修复和愈合是一个复杂的生物控制机制，其通过阳性和阴性信号起作用。这种信号在控制细胞增殖，分化和迁移水平起作用，并典型地由生长因子多肽介导。在此方面，重要的生长因子包括表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF-I和-II)。

已经报道人IGF-I发挥广泛的生物学活性，包括刺激细胞增殖，分化和迁移，保护蛋白质免于降解和细胞程序死亡，以及调节内分泌因子如生长激素。IGF-II与IGF-I具有相似性质，但表现为与癌发生及胎儿与胚胎发育更相关，IGF-I在出生以后的发育中具有更大的作用。

IGF-I和IGF-II均通过与I型IGF受体(IGFR)结合而发挥作用。这种相互作用所需的IGF的可利用性由胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP 1-6)调节。IGFBP已知可阳性和阴性调节IGF功能，以及呈现IGF-非依赖性活性。

IGF途径的另一种功能成分是II型IGFR，其还已知是阳离子非依赖性6-磷酸甘露糖受体(CI-MPR)。II型IGFR是一种多功能蛋白质，其结合携带6-磷酸甘露糖组分的溶酶体酶，以及IGF-II，但还不清楚与IGF-II结合的功能意义(O'Dell&Day，1998,国际生物化学细胞生物学杂志30767;Braulke,1999,Horm.Metab.Res.31 242;Nykjaer等，1998,细胞生物学杂志141 815)。

也已经报道IGF结合另一组蛋白质，称为“IGFBP-相关蛋白质”，这一组蛋白质呈现结构相似性并包括结缔组织生长因子(CTGF)及由mac25，nov和cyr61基因编码的产物。与IGFBP相比，这些物质结合IGF的亲和性较低。

最近，鉴别出玻连蛋白(VN)是一种胞外基质蛋白，结构与IGFBP和IGFBP-相关蛋白不相关，其结合IGF-II但不结合IGF-I(Upton等，1999,内分泌学1402928)。

玻连蛋白是一种75kD糖基化胞外基质蛋白，其也在血液中发现，并与癌症，骨疾病和病理失调包括血管发生相关联(参见Schvartz等，1999,生物化学细胞生物学杂志31539)。玻连蛋白在如血管发生和致瘤发生等病症中的作用，至少部分源于玻连蛋白结合整联蛋白及与尿激酶纤溶酶原激活物系统成分(例如PAI-1,uPAR,纤溶酶原)相互作用的能力，从而促进细胞增殖，粘着，扩散和迁移。玻连蛋白更特异性参与应答药物治疗而防止致瘤细胞程序死亡(Uhm等，1999,癌症临床研究5 1587)。玻连蛋白表现为在循环中是IGF-II的载体(McMurtry等，1996,内分泌学杂志150 149)。

发明目的

本发明人令人惊奇地揭示了IGFBP能结合玻连蛋白，而且当IGF-I与IGFBP结合时，其可以结合玻连蛋白。

因此本发明的一个目的是提供一种分离的含有IGFBP和玻连蛋白的复合物。

发明概述

第一方面，本发明提供了一种分离的多肽复合物，其包含一种生长因子结合蛋白和玻连蛋白。

优选地，所述分离的多肽复合物还包含一种生长因子。

一种优选的生长因子是胰岛素样生长因子-I(IGF-I)。

其它生长因子包括表皮生长因子(EGF),成纤维细胞生长因子(FGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),骨桥蛋白，血小板反应蛋白-1,腱生蛋白-C,PAI-1,纤溶酶原,纤维蛋白原,纤维蛋白和运铁蛋白。

一种优选的生长因子结合蛋白是选自IGFBP1,IGFBP2，IGFBP3,IGFBP4,IGFBP5和IGFBP6的一种胰岛素样生长因子结合蛋白。