[发明专利]一种利用重组基因工程菌获得链霉菌胰蛋白酶酶原的方法

权利要求书

1.一种利用重组基因工程菌获得链霉菌胰蛋白酶酶原的方法，其特征在于以重组基因工程菌毕赤酵母GS115为种子，活化后按10%的接种量接入发酵培养基中中，控制发酵温度30℃，摇床转速200r/min，发酵3-4天，所述重组基因工程菌染色体上携带有胰蛋白酶酶原的基因。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胰蛋白酶酶原的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述基因工程菌的构建方法包括如下步骤：

第一步：化学全合成链霉菌属胰蛋白酶酶原基因；

第二步：将第一步得到的类胰蛋白酶酶原基因片段与毕赤酵母常用表达载体pPIC9K双酶切、连接，得到含有胰蛋白酶酶原基因的重组质粒；

第三步：将重组质粒电击转化宿主毕赤酵母GS115，构建高效表达胰蛋白酶酶原的组成型毕赤酵母重组菌株。