[发明专利]一种以山葵根为外植体的山葵愈伤组织培养方法有效
申请号: | 201210277158.4 | 申请日: | 2012-08-06 |
公开(公告)号: | CN102823491A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 王跃华;任三军;赵钢;孙雁霞;刘洪明;李亚梅;李琴;冯玉艺;任强 | 申请(专利权)人: | 成都大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 成都科奥专利事务所(普通合伙) 51101 | 代理人: | 王蔚 |
地址: | 610106 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 山葵根 外植体 山葵愈伤 组织培养 方法 | ||
1.一种以山葵根为外植体的山葵愈伤组织培养方法,其特征在于包括如下步骤:
(1) 外植体的处理:取从山葵植株剪下的山葵根,用流水冲洗干净后,放于滤纸上吸干表面水分,然后将其放在超净工作台上用浓度为0.1 %~0.15%的升汞消毒5~8 min,再用无菌水冲洗2~5次后用已灭菌的滤纸吸干表面的水分;
(2) 愈伤组织的诱导培养:将已消毒的山葵根切为1-2cm的长度,然后接入愈伤组织培养基MS+6-BA0.5~4.0 mg·L-1+2,4-D 1.0~6.0 mg·L-1+IAA 0.5~3.0 mg·L-1中进行诱导培养,培养条件为:温度10~28℃,每天光照4~10小时,光照强度为600~1200 lx;
(3) 愈伤组织的增殖培养:将步骤(2)制得的愈伤组织转接入愈伤组织增殖培养基1/2MS+6-BA 0~1.0 mg·L-1 +2,4-D 1.0~4.0 mg·L-1+KT 0.5~1.0 mg·L-1+硫代硫酸钠0.5~4.0 g·L-1中进行增殖培养,培养条件为:温度10~28℃,每天光照6~12小时、光照强度为800~1500 lx;
上述所有培养基的pH值为5.6~6.5、蔗糖15~30 g·L-1、琼脂5.0~6.0 g·L-1。
2.根据权利要求1所述的一种以山葵根为外植体的山葵愈伤组织培养方法,其特征在于:步骤(3)中所述愈伤组织为颜色为黄绿色的愈伤组织。
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