[发明专利]高效拮抗黄瓜枯萎病病害的木霉菌菌株及其用途

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种高效拮抗黄瓜枯萎病病害的木霉菌菌株及其用途。

背景技术

黄瓜（Cucumis sativus L.）是我国设施栽培的主要种植瓜类蔬菜之一，由于设施栽培倒茬困难、连作障碍日趋严重，作为常见且难以控制的土传病害，黄瓜枯萎病严重影响黄瓜生产产量。黄瓜枯萎病又叫蔓割病、萎蔫病,是土壤传播、根部侵入的一种维管束病害，一般发病率20%-30%,严重地块达80%-90%,甚至全部毁种。近几年，由于我国黄瓜栽培面积的扩大，黄瓜枯萎病几乎在全国各地都有发生，其中吉林、辽宁、山东、湖北、北京等18个省市发生严重。发病高峰期，一般年份发病率在20%左右，严重的田块高达80%-90%，已成为制约黄瓜产量和品质的重要因素。目前我国控制黄瓜枯萎病主要应用化学农药，使用效果不稳定，且长期大量施用化学农药严重污染环境、威胁人民身体健康，且病原菌逐渐产生抗病性随之变异产生很多生理小钟。因此，黄瓜枯萎病防治急需绿色安全无公害且靶标性强的生物农药。

十二五规划中，国家越来越重视绿色安全低毒的生物农药的开发及应用推广，同时农业部也投入大量资金用于生物防治资源的搜集。目前用于黄瓜枯萎病生物防治的微生物资源主要有丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhiza，AM)、多粘类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、海洋枯草芽孢杆菌、黄瓜内生细菌、一些致病菌、木霉菌等。其中，木霉菌（Trichoderma Pers.ex Fr.），是国际上应用普遍的工业、农业微生物，在农业生产中主要做为植物病害生物防治微生物和环境修复微生物而得到应用。作为国际公认的生防菌，其生防、促生、土壤改良、环境净化等效果已得到全世界的关注和认可，具有极大的开发潜力。孟洁等实验证明木霉菌对黄瓜枯萎病的防治效果良好，同时还具有促进黄瓜提前开花和增加产量的作用；郭敏等人用绿色木霉诱导黄瓜植株产生抗性，枯萎病防治效果明显。目前，木霉菌制剂产品中暂无专一高效防治黄瓜枯萎病的产品。因此，针对黄瓜枯萎病菌防治，筛选高效拮抗木霉菌菌株日渐重要，研究其菌株特性对防治黄瓜枯萎病菌剂开发有必要的推进作用，最终得以快速实现工业化规模生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效拮抗黄瓜枯萎病病害的木霉菌菌株及其用途；本发明的哈茨木霉的菌株生长速度快、产孢量大、离体对峙病原菌抑制率达43.01%，非挥发性抑制物对黄瓜枯萎病的抑制率为41.33%，挥发性物质对黄瓜枯萎病的抑制率为11.49%，几丁质酶活为3.9573U，针对黄瓜枯萎病的活体防效为71.43%，能够高效防治黄瓜枯萎病病害，进而能够用于制备防治黄瓜枯萎病的农药。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

第一方面，本发明涉及一种木霉菌菌株，所述木霉菌菌株为哈茨木霉（Trichoderma harzianum）SH2303 CGMCC NO.4963，其具有拮抗黄瓜枯萎病病害的能力。

优选地，所述木霉菌菌株的ITS序列如SEQ ID NO.1所示。

第二方面，本发明还涉及前述木霉菌菌株在制备防治黄瓜枯萎病农药中的用途。

所述哈茨木霉（Trichoderma harzianum）SH2303 CGMCC NO.4963具有以下微生物学特征：

形态学特征为：菌丝透明，壁光滑；分生孢子梗透明，壁光滑，直或者波曲，近基部宽度为8μm，多数区域变细，粗大分生孢子梗复杂分枝，初级分枝几乎呈直角，常2～3个旋涡状排列，向基部逐渐变长整个结构类似金字塔形状；瓶梗为安瓿形至亚球形或坛形，顶生瓶梗长达10μm，基部明显缢缩，中部显著膨大；分生孢子亚球形至卵圆形或短的椭球形，壁光滑很少粗糙半透明至浅绿色。

培养特征为：25℃黑暗条件下PDA培养，菌落生长快速，3天后多数菌株的菌落半径可达8cm，气生菌丝呈卷毛状，白色至灰色。

本发明的哈茨木霉（Trichoderma harzianum）SH2303，该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期是2011年06月17日，保藏号为CGMCC No.4963。