[发明专利]一种优化的碱性果胶酶基因及其应用

权利要求书

1.一种优化的碱性果胶酶基因，其特征在于核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.用于表达权利要求1所述碱性果胶酶基因的质粒，其特征在于核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

3.一种产碱性果胶酶重组枯草芽孢杆菌，其特征在于含有权利要求2所述的质粒，高效表达权利要求1所述碱性果胶酶基因。

4.权利要求3所述重组枯草芽孢杆菌的构建方法，其特征在于，化学全合成或PCR扩增碱性果胶酶基因序列及碱性蛋白酶信号肽基因序列，构建重组质粒，优化该质粒RBS序列；转化重组质粒到枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WB600受体。

5.应用权利要求3所述枯草芽孢杆菌生产碱性果胶酶的方法，其特征在于从甘油管中按0.4%的接种量接入25mL/250mL三角瓶，回旋式摇床转速200rpm，培养温度为37℃，培养14h；发酵培养：将培养好的种子培养液按8%(v/v)的接种量接种至25mL/250mL三角瓶中进行培养，培养温度为37℃，摇床转速200rpm，发酵2-3天。