[发明专利]乙酰胆碱酯酶作为核酸酶的应用

权利要求书

1.乙酰胆碱酯酶或其激动剂或拮抗剂的用途，用于制备调节核酸稳定性或调节细胞凋亡的组合物。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的乙酰胆碱酯酶或其激动剂用于制备损伤核酸和/或促进细胞凋亡的组合物。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的乙酰胆碱酯酶的激动剂选自：引导乙酰胆碱酯酶或其编码基因进入细胞核的试剂，镁离子，钙离子或可以形成镁离子和/或钙离子的物质。

4.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的核酸是肿瘤或病毒相关核酸，或所述的细胞是肿瘤细胞。

5.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的乙酰胆碱酯酶或其激动剂用于制备抑制肿瘤的组合物。

6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的乙酰胆碱酯酶抑制剂用于制备保护核酸和/或抑制细胞凋亡的组合物。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的抑制剂选自：核酸抑制物，蛋白抑制剂，抗体，配体，蛋白水解酶、蛋白结合分子、EDTA。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的核酸抑制物选自：SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的干扰分子。

9.一种分离的乙酰胆碱酯酶的片段或变异体，其选自：

(b)如SEQ ID NO:5中第32-138位氨基酸序列的多肽；

(c)如SEQ ID NO:5中第2-138位氨基酸序列的多肽；

(d)如SEQ ID NO:5中第2-191位氨基酸序列的多肽；

(e)如SEQ ID NO:5中第2-247位氨基酸序列的多肽；

(f)SEQ ID NO:5中第2-398位氨基酸序列的多肽；

(g)SEQ ID NO:5中第32-578位氨基酸序列的多肽；

(h)GenBank登录号NP_033729.1所示的氨基酸序列中第32-579位氨基酸序列的多肽；

(i)如(e)-(g)任一所述多肽的氨基酸序列，其中第234位、365位和/或478位发生变异的多肽；

(j)将(b)-(i)任一的多肽的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有SEQ ID NO:5多肽功能的多肽；

(k)具有SEQ ID NO:5多肽功能的(b)-(j)任一多肽的片段；或

(l)具有SEQ ID NO:5多肽功能的包含(b)-(k)任一多肽的氨基酸序列的多肽。

10.一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(1)编码如权利要求9所述多肽的多核苷酸；

(2)与多核苷酸(1)互补的多核苷酸。

11.如权利要求10所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的核苷酸序列选自：

(i)如SEQ ID NO:4中第4-414位核苷酸序列的多核苷酸；

(ii)如SEQ ID NO:4中第第4-573位核苷酸序列的多核苷酸；

(iii)如SEQ ID NO:4中第第4-741位核苷酸序列的多核苷酸；

(iv)如SEQ ID NO:4中第第4-1194位核苷酸序列的多核苷酸；或

(v)如SEQ ID NO:4中第94-1734位核苷酸序列的多核苷酸。

12.一种载体，其特征在于，它含有权利要求10或11所述的多核苷酸。

13.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求12所述的载体；或其基因组中整合有权利要求11或12所述的多核苷酸。

14.一种权利要求9所述的乙酰胆碱酯酶的片段或变异体的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)在适合表达的条件下，培养权利要求13所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出权利要求9所述的乙酰胆碱酯酶的片段或变异体。

15.权利要求9所述的乙酰胆碱酯酶的片段或变异体、权利要求10或11所述的多核苷酸、权利要求12所述的载体或权利要求13所述的宿主细胞的用途，用于制备调节核酸稳定性或调节细胞凋亡的组合物或用于制备抗肿瘤的药物。