[发明专利]大黄素-8-β-D-葡萄糖苷在制备治疗突触功能障碍性疾病的药物和保健产品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药学领域，尤其是一种大黄素-8-β-D-葡萄糖苷在制备治疗突触功能障碍性疾病的药物和保健产品中的应用。

背景技术

众所周知，神经信息的传递是通过突触部位神经递质的释放来完成, 神经递质贮存于突触囊泡中, 囊泡是神经末梢特有的细胞器, 含递质的囊泡群积聚在突触活性区。神经元受到刺激, 产生神经冲动, 传至突触前膜, 引起突触前膜去极化, 细胞外Ca²⁺ 内流, 触发突触囊泡向突触前膜靠近和融合, 引起突触囊泡释放神经递质。突触素与钙离子有很强的结合力, 促使突触小泡与突触前膜融合, 参与细胞排粒过程中“融合孔”的形成。因而，突触素对神经递质的快速释放和突触小泡的胞吐具有重要作用。而突觸功能失常與神經退化性疾病的密切關係。已有研究证明，在神经退行性疾病早期都有突触的功能异常和突触丢失，而伴有认知或运动等功能障碍。如在老年性痴呆疾病(AD)中，AD患者及APP转基因动物脑组织中突触素的表达显著下降; 在糖尿病脑病中，患有糖尿病脑病大鼠海马内突触素的表达显著下降。因此，对突触的保护是一个重要的神经保护治疗措施实施的靶点，对突触功能障碍及缺失进行有效的干预可能延缓神经退行性疾病的进程。

发明内容

本发明的目的是：提供一种大黄素-8-β-D-葡萄糖苷在制备治疗突触功能障碍性疾病的药物和保健产品中的应用，其治疗效果好，副作用小。

本发明是这样实现的：大黄素-8-β-D-葡萄糖苷在制备治疗突触功能障碍性疾病药物和保健产品中的应用。

大黄素-8-β-D-葡萄糖苷与药用载体或添加剂混合制成片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂、糖浆剂、乳剂、口服液、注射液或粉针剂。

中药虎杖（Polygonum cuspidatum Sied. et Zuc. ）又称阴阳莲、苦仗、斑根、紫金龙，为蓼科属植物干燥根及根茎，为我国传统中药。主要分布于华东、中南及辽宁、陕西、甘肃、四川、贵州、云南等地。虎杖具有活血化瘀、清热解毒、去谈止咳、祛风利湿等功效。我们通过活性筛选发现虎杖70%乙醇提取物的正丁醇萃取物（ASB）能够明显地上调细胞突触素I蛋白水平的表达，且能对抗 Aβ_25-35 所导致 α3、α7 亚单位蛋白质的表达降低，具有较好的开发应用价值。

为了阐明虎杖中上调细胞突触素I蛋白水平的表达的物质基础，我们采用活性追踪法对其活性部位进行了追踪，确定了其活性成分为大黄素-8-β-D-葡萄糖苷。

虎杖有效部分活性筛选

1.1实验材料及试剂

仪器

隔水式电热恒温培养箱 (SHELLAB2300型，美国)； Beckman 21R型冷冻离心机 (美国 Beckman 公司)；电热恒温水浴锅 (北京市光明医疗仪器厂)； -101型倒置显微镜 (江南公司)； BIO-RAD Power-pac 3000电泳仪 (美国 BIO-RAD公司)； SANYO SIM-P30型制冰机 (日本三洋电机)； TS-92型万向摇床 (江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司)； ELX800型酶标仪 (美国 BIO-TEC公司)； HARRIS-80℃冰箱 (美国)；细胞富集器 (美国)；超净工作台 (苏净集团安泰公司)； 2300型CO₂培养箱 (Sheldon Manufacturing公司)。

试剂

DMEM培养液购自Gibco Invitrogen 公司(英国)；源于人脑的神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y细胞) 购于German Collection of Microorganisms and Cell Cultures 公司(德国)；其他化学试剂购自Sigma公司。

1.2活性筛选

供试样品的制备

    取虎杖粗粉，加10倍量的70%的乙醇提取2次，每次2小时，滤过。滤液回收乙醇至清膏。取浸膏加水分散，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取。回收溶媒分别得PE萃取物(PEP)、EtOAc萃取物(PEE)、n-BuOH萃取物(PBEB)，母液回收溶媒后得H₂O部分(CW)。取各萃取物适量用DMEM 液(DMSO助溶) 配制成浓度为1 g生药/mL的样品溶液，备用。

活性筛选

A.细胞培养，Aβ及药材的处理