[发明专利]一种糖敏灵制剂中5种化学成分的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于现代中药应用领域，特别涉及一种对糖敏灵制剂中5种药物活性成分同时进行含量测定的方法。

背景技术

糖敏灵丸是在临床验证的有效方开郁清胃颗粒基础上加减变化与剂型改革而成。糖敏灵丸由黄连、大黄、黄芩、白芍、柴胡、枳实、山楂、乌梅、半夏、天花粉共十味常用中药组成，具有开郁清胃、滋阴降火、通腑泻浊之功效。临床观察证实其对II型糖尿病的血糖有明显的改善作用，尤其是对体型偏胖的早中期II型糖尿病患者效果更加显著。同时，药理实验揭示糖敏灵能显著增强高热量饲料诱导的胰岛素抵抗模型糖尿病大鼠和自发性II型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性。

为使糖敏灵药物生产标准化，达到疗效确切，质量稳定的目的，需要准确检测糖敏灵制剂的化学成分。糖敏灵丸所含的药物成分中，可以确定的药物活性物质包括：没食子酸、原儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酸。这些物质均属于已知物质。为更加全面控制糖敏灵制剂的质量，建立满足中药现代化的质量控制标准，需要一种可以同时检测糖敏灵制剂中多种化学成分的分析方法。

发明内容

为使糖敏灵药物生产标准化，达到疗效确切，质量稳定的目的。本发明提供了一种检测本发明制剂中5种药物活性物质的方法，该方法采用HPLC法对其中的药物活性物质同时进行含量测定。该方法精密度、灵敏度、稳定性均好，确保产品质量的“安全、均一、稳定、有效、可控”。

本发明提供一种糖敏灵制剂中化学成分的检测方法，其特征在于，检测样品采用水或低级醇提取，然后采用高效液相色谱进行检测，色谱条件为采用C18色谱柱，流动相A相为乙酸或磷酸或甲酸水溶液，B相为乙腈或甲醇，检测器为二极管阵列检测器。

根据本发明实施方式之一，检测样品采用水或甲醇超声提取。

优选的，检测样品采用水超声提取。

分别考察了水和不同浓度的甲醇等溶媒，结果表明水和甲醇的提取效率较高，其中水的提取效率最高。为了除去色谱测定是大部分弱极性物质的干扰，使用ODS小柱对待测成分进行纯化、富集，具有良好的提取回收率。

根据本发明的实施方式之一，色谱流动相A相为0.01%-0.1%磷酸水溶液，B相为乙腈。

优选的，色谱流动相A相为0.05%磷酸水溶液，B相为乙腈，采用梯度洗脱，方法为：

0～20min，8%B相→20%B相；

20～38min，20%B相→22%B相；

38～45min，22%B相→28%B相。

分别用甲醇-水、乙腈-水、乙腈-水-磷酸或甲酸或乙酸作流动相时样品的分离效果，结果表明采用乙腈-水-磷酸流动相系统所得色谱峰峰形好、保留时间短，可达到理想的分离效果。

根据本发明的另一实施方式，色谱流动相流速为0.8-1.2mL/min。

根据本发明的再一实施方式，色谱柱温为30-40℃。

根据本发明的再一实施方式，检测器波长为210nm-256nm。

优选的，检测器波长为0~10min，220nm；10~45min，230nm。

实验表明：没食子酸和原儿茶素的最大吸收波长是220nm，芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酸的最大吸收波长是230nm，为提高各成分检测的灵敏度和准确度，在10min时将检测波长由220nm转换至230nm，各成分均以最大吸收波长作为检测波长。

根据本发明，检测到的糖敏灵制剂中的化学成分为：糖敏灵制剂中的没食子酸、原儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酸。它们的含量分别为0.7496-2.035mg·g^-1、3.882×10^-2-8.440×10^-2mg·g^-1、1.121-1.795mg·g^-1、2.365-5.140mg·g^-1、0.5389-1.422mg·g^-1。

本发明利用HPLC测定了糖敏灵中5种化学成分的含量，具有很好的线性、重复性、重现性和回收率，有助于更加全面控制糖敏灵的质量。

本发明所述糖敏灵制剂包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉针剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、滴剂、贴剂、滴丸。因为药物活性成分相同，所以本发明提供的方法可以用于多种不同制剂的检测。

本发明所述糖敏灵丸由下列重量份的原料制成：